液质联用精品课件.pptVIP

同位素峰的识别例：35Cl100%,37Cl32.5%MM+2M+4M+6Cl,n=1:10.325Cl2,n=2:10.6500.106Cl3,n=3:10.9750.3170.034*ESI质谱图实例正离子模式1.[M+H]+2.[M+Na]+[M+K]+[M+H]+3.[M+H+CH3OH]+4.[2M+H]+负离子模式1.[M-H]-2.[2M-H]-*实例1[M+Na]+[M+K]+[M+H]+MW=582*实例2[M+H]+M=572*M=616M=694实例3*-CH2COOCH3-COOCH3-CH2-CH2-CH2-C=O实例4*-H2O-CHOHCH3-H2O-CHOHCH3-CH3实例5*-CH2COOH-CH3-2CH3-CH2-CH2实例6*-CH2COOH-CH2COOH实例7*原料+H+原料+Na+M+H+M+Na+M+K+实例8*+H+实例9*+H+实例10*+H++H++H+实例11*实例12负离子二级质谱-H2O-CO2-CO2*离子源的选择*质量分析器将离子源产生的离子按其质量和电荷比（m/z）的不同进行分离，得到按质荷比（m/z）排列而成的质谱图质量分析器的种类很多：有磁质量分析器，四级质量分析器（四级杆滤质器），飞行时间质量分析器，离子阱质量分析器等三重四极杆（串联质谱）*TSQ质谱组件QOOQOQ1HyperquadQ3HyperquadQ2CollisionCellDetectionSystemIonSourceInterfaceHeatedCapillaryMassAnalyzer*Q1Q3Q2Q0DynodeTurbo*仪器主要功能定性分析（混合物）样品中的物质：分子量、分子结构、相对含量定量分析样品中的物质含量精密质量数的测定*高分辨质谱进行元素组成分析任何一种同位素的质量并不是正好的整数。▼为了区分这四个离子，测量的质量的准确度需达到130ppm。即小数点后第四位是准确的。▼元素组成信息随着质量的增加而呈指数地上升，对质谱质量的测定准确度要求更高。12C=12，1H=1.007782506，14N=1416O=15m=43.0184Da的离子必定是C2H3O+，不可能是C3H7+(m=43.0058)或C2H5N+(m=42.9984)，或CH3N2+(m=43.0296)。*仪器适用范围仪器配备决定其适用范围液相色谱的条件（色谱柱）离子源的类型*仪器测试条件的选择液相色谱条件质谱条件*HPLC条件的选择(流动相)根据化合物类型选择流动相组成，甲醇-水，乙腈-水或甲醇-乙腈-水（**DMF、DMSO、DCSO、THF）某些化合物只有某种流动相体系才出峰一般正离子方式用甲醇，负离子方式用乙腈好些梯度的设定：梯度变化太快对离子化效率影响很大，相应源参数也应该改变，所以恒定比例流动相能满足分离分析要求时，尽量不用梯度，尤其定量分析时*流动相的选择流动相中加入甲酸、乙酸等可提高正离子化效率(**)液质联用中，流动相有时需要加入缓冲盐ACH3COONH4BHCOONH4CKH2PO3是否加酸不是绝对的，具体应根据LC的分离情况、样品在酸性条件下的稳定性等决定(**)通常pH值低时，[M+H]+比率高；pH值高时，[M+Na]+、[M+K]+，或[M+NH4]+比率高*色谱柱的选择FlowRate ColumnI.D.1.0mL/min 4.6mm0.5mL/min 3.0mm0.2mL/min 2.1mm50mL/min 1.0mm10mL/min CapillaryLC流速一般根据色谱柱规格和电离方式来确定APCI0.2-2ml/minESI5-300μl/minroutinely