发酵液的预处理.pptVIP

六、加吸附剂法或加盐法该法是将吸附剂加入到细菌发酵液中，使菌体吸附在吸附剂上的方法；或用无机盐等在发酵液中形成的大絮状物把发酵液中的悬浮粒子吸附在其中，使悬浮粒子沉淀下来，从而大大改善发酵液的过滤特性。采用的吸附剂：磷酸氢二钠和氯化钙形成的CaHPO4凝胶、氧化铝凝胶、聚丙酰胺凝胶等。第31页，讲稿共70页，2023年5月2日，星期三七、高价无机离子去除的方法发酵液中主要的无机离子有：Ca2+、Mg2+和Fe3+等。主要影响离子交换树脂的交换容量。1、钙离子的去除发酵液中的钙离子主要来自培养基中的营养盐成分，常采用酸化剂将其除去。通常使用的酸化剂为草酸以及草酸钠，形成草酸钙沉淀。草酸钙还能使杂蛋白质凝固，改善发酵液的过滤性能。第32页，讲稿共70页，2023年5月2日，星期三2、镁离子的去除用三聚磷酸钠，形成磷酸镁沉淀，即可消除对离子交换的影响。（三聚磷酸钠也可除去钙离子）3、铁离子的去除用黄血盐，形成普鲁士蓝沉淀。也可采用加入碱化剂（如NaOH、NH4OH等）生成Fe（OH）3沉淀，同时也能沉淀部分蛋白质。第33页，讲稿共70页，2023年5月2日，星期三八、可溶性杂蛋白质去除的方法对产品分离过程的危害：（1）直接影响产品质量和收得率；（2）杂蛋白质产生乳化现象，使两相分离不清；（3）杂蛋白质使过滤介质堵塞或受污染，影响过滤速率。杂蛋白质的去除以下常用方法。第34页，讲稿共70页，2023年5月2日，星期三1、等电点沉淀法利用蛋白质两性物质在等电点时溶解度最低，易产生沉淀的性质。用酸或碱调发酵液pH。2、加热变性法（最常用）蛋白质从有规则的排列变成不规则结构的过程，称为变性，变性蛋白质的溶解度较小。加热不仅使蛋白质变性，同时降低液体枯度，提高过滤速率。柠檬酸生产，发酵液加热80℃，蛋白质变性凝固和降低发酵液粘度，即可大大提高过滤速率。第35页，讲稿共70页，2023年5月2日，星期三3、化学变性沉淀法使蛋白质变性的化学因素有：极端pH、加酒精、丙酮等有机溶剂或表面活性剂等。生产常用的方法：（1）调pH使蛋白质变性沉淀如在抗生素生产中，常将发酵液pH调至酸性范围(pH2~3)或碱性范围(pH8~9)使蛋白质凝固，一般以酸性下除去的蛋白质较多。第36页，讲稿共70页，2023年5月2日，星期三（2）加入有机溶剂、碱金属中性盐、表面活性剂等，使蛋白质粒子的双电层破坏，而沉淀。（3）加入化学试剂pH＜PI，与一价阴离子形成沉淀；pH＞PI，与一些阳离子形成沉淀蛋白质在酸性溶液中，与阴离子（三氯乙酸盐等）形成沉淀；在碱性溶液中，与阳离子（Ag+、Cu2+、Zn2+、Fe3+、Pb2+）形成沉淀。第37页，讲稿共70页，2023年5月2日，星期三变性法存在一定的局限性。如加热法只适合于对热较稳定的目的产物；极端pH也会导致某些目的产物失活，并且要消耗大量酸碱；而有机溶剂法通常只适用于所处理的液体数量较少的场合。第38页，讲稿共70页，2023年5月2日，星期三4、吸附法加入某些吸附剂或沉淀剂吸附杂蛋白质而除去。例如在枯草芽抱杆菌发酵液中，加入氯化钙和磷酸氢二钠，两者生成庞大的凝胶，把蛋白质、菌体及其他不溶性粒子吸附并包裹在其中而除去，从而可加快过滤速率。第39页，讲稿共70页，2023年5月2日，星期三九、色素及其他杂质去除的方法常用脱色方法：离子交换和活性炭吸附等方法。第40页，讲稿共70页，2023年5月2日，星期三第三节发酵液固液分离及设备一、发酵液固液分离的方法发酵液的固液分离是指用过滤、离心等手段除去发酵液中的悬浮固体（如菌体、细胞、细胞碎片、蛋白质及其絮凝体）的过程。第41页，讲稿共70页，2023年5月2日，星期三1、发酵液固液分离的目的产物或是胞内或是胞外。（1）为获得含所需产物的