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第3节基因工程与转基因生物转基因食品转基因食品河南省新乡县转基因抗虫棉实验田一、基因工程我国具有自主知识产权的抗虫棉的培育程序:将重组DNA导入选育棉花细胞内使抗虫基因在该棉花细胞中表达从具有抗虫性状的细菌DNA分子中获取抗虫基因将抗虫基因与运载体拼接成为重组DNA需要三种工具:◆切割DNA◆连接DNA和运载体◆运载体1、切割DNA的工具——限制性核酸内切酶就是当异源DNA分子渗入细胞后,要遭到它的切割破坏◆专一性——能识别双链DNA分子的某些特定脱氧核苷酸序列,并且切断其中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的键。如:特点:限制酶EcoRⅠ识别的碱基序列GAATTCCTTAAG限制酶HindⅢ识别的碱基序列AAGCTTTTCGAA◆限制异原DNA的入侵并使之失去活力,对自身的DNA无损害作用。◆限制酶可以产生黏性末端——即在切割时,DNA双链不在同一处断开,因而产生的片段都带有数个碱基的尾巴。如:GAATTCGAATTCCTTAAGCTTAAGAATTCGGCTTAA黏性末端黏性末端切下的DNA片段2、DNA连接酶广泛存在于:细菌、噬菌体、酵母菌、植物和动物细胞内。作用:将断裂的DNA黏性末端连接起来——DNA连接酶2、化学浆糊运载体3、分子运输车〔2〕条件能在宿主细胞内自我复制并稳定地保存〔1〕作用在宿主细胞大量复制目的基因将目的基因运送到宿主细胞中具有多个限制酶切点具有标记基因双链闭环DNA分子能自我复制带抗性基因质粒〔3〕最常用导入的生物细胞,即能接纳重组DNA的活细胞。人们为了得到其表达产物而把它转入到新的生物体中去的基因。目的基因受体细胞二、基因工程的根本过程四个步骤:◆获取目的基因◆目的基因与运载体重组◆重组DNA分子导入受体细胞◆筛选含目的基因的受体细胞◆获取目的基因目的基因——是人们为了得到其表达产物而把它转入到新的生物体中去的基因从生物体细胞中别离通过化学方法人工合成获得目的基因的方法步骤基因定位(确定目的基因在DNA上的位子)用限制酶从DNA分子中切取mRNADNA方法逆转录酶
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