微生物检测操作流程.docVIP

文献类型

操作规程(SOP)

文献编号

编制人

编制日期

年月日

编制部门

审核人

审核日期

年月日

审核部门

批准人

同意日期

年月日

颁发部门

编订根据

《中华人民共和国药典》2023年版、《中国药物检查原则操作规范》2023年版

替代文献

分发部门

生效日期

年月日

微生物程度检查操作规程

1.目的

建立一种微生物程度检查(包括细菌、霉菌、酵母菌)原则工作程序，规范QC微生物

程度检查人员的微生物程度检查操作。

2.范围

合用于我司的细菌、霉菌、酵母菌的程度检测。

3.责任者

QC微生物程度检查人员；质量管理部

4.内容

4.1检测准备

QC人员接到微生物程度检查的《工作进程计划单》后，查对《取样指令》,确定微生物程度检查所需的容器具、试液、培养基等的项目和数量，执行微生物检查准备工作操

作程序和培养基配制操作规程，进行微生物程度检查前的准备工作。

为了保证被检品在取样后规定的时间内完毕检查，取样前应准备好检查需要的多种器

皿(清洗→干燥→包裹)、培养基和稀释剂等(配制→分装→包裹),并灭菌备用。

4.2供试液的制备

4.2.1供试液供试液是指按照供试品的理化特性与生物学特性，采用合适的措施将供

试品制成供试验用的均匀液体。

供试液的制备根据供试品的理化特性与生物需特性，采用合适的措施制备供试液。假如使用了乳化剂、分散剂、中和剂和灭活剂，其用量应证明是有效的，并对微生物的

生长和存活无影响性。

.1可溶性液体供试品

文献名称

微生物程度检查操作规程

文献类型

操作规程(SOP)

文献编号

编订根据

《中国药典》2023年版、《操作规范》2023年版

替代文献

取供试品10ml,加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml,混匀，作为供试液。可

溶性液体制剂可用混合的供试品原液作为供试液。

.2非水溶性液体供试品

油剂可先加入适量的无菌聚山梨酯80使供试品分散均匀，然后再加0.9%无菌氯化钠-

蛋白胨缓冲液至100m,混匀，作为供试液。

4.2.2.3水溶性固体、半固体或黏稠性供试品

称取供试品10g,置PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml中，用匀浆仪或其他合适措施，混匀，作为1:10供试液。必要时可加适量的无菌聚山梨酯80,并置水浴中合适

加温使供试品分散均匀。

.4非水溶性供试品

取供试品5g(5m1),加入含溶化的(温度不超过45℃)5g司盘80、3g单硬脂酸甘油酯、10g聚山梨酯80无菌混合物的烧杯中，用无菌玻棒搅拌成团后，慢慢加入45℃pH7.0

无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml,边加边搅拌，使其充足乳化，作为1:20供试液。

.5肠溶及结肠溶制剂供试品

取供试品10g,加PH6.8无菌磷酸盐缓冲液(用于肠溶制剂)或PH7.6无菌磷酸盐缓冲

液(用于结肠溶制剂)至100ml,置45℃水浴中，振摇，使溶解，作为1:10的供试液。

.7具抑菌成分供试品

当供试品抑菌活性时，应消除供试液的抑菌活性后，再依法检查，一般使用培养基稀释法，取规定量的供试液，至较大量的培养基中，使单位体积内的供试品含量减少，至不含抑菌作用。取低稀释级供试液(原液或1:10的供试液)2份，每份各1ml,分别注入5个或5个以上平皿中(每皿0.2ml或0.2ml),每个平皿倾注培养基约15ml,混匀，凝固后，倒置培养，按每1ml分注的平皿点计菌落数之和计数，即为每1ml的菌落数，

共得2组数据，再以2组数的平均数乘以稀释倍数的值汇报菌数。

.8供试液的制备若需用水浴加温时，温度不应超过45℃,时间为30min。

文献名称

微生物程度检查操作规程

文献类型

操作规程(SOP)

文献编号

编订根据

《中国药典》2023年版、《GMP》2023年版

替代文献

供试液的梯度稀释(10倍递增稀释法)

.1取3或4支灭菌试管，分别加入9mlpH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液作为稀释剂。

加稀释剂后，应立即塞上试管塞。

.2另取1支1ml灭菌吸管，右手执管插入1:10(1级)均匀供试液内不低于液面2.5cm,反复吸吹约10次，吸液时，先吸至高于吸管上部刻度少许，然后提起吸管，贴与容器内壁，调整液量至1ml刻度，左手执装有9mlpH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液的试管并将塞打开，倾斜，将吸管移至第2级稀释管的内壁近液面处(勿接触液面),缓慢地放出所有供试液(吸管内应无黏附或残留液体),混匀，即为1:100供试液(2级)。以此类推，根据供试品污染程度，可稀释至1:10、1:10?等合适稀释级(3~4级)。