中药材中甲拌磷的快速检测 胶体金免疫层析法.pdfVIP

中药材中甲拌磷的快速检测胶体金免疫层析法

1范围

本文件规定了中药材中甲拌磷的胶体金免疫层析快速检测方法。

本文件适用于党参、黄芪、麦芽、薏苡仁等中药材中甲拌磷的快速定性测定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期

的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括

所有的修改单）适用于本文件。

《中国药典》2020年版第四部0211药材和饮片取样法

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

国市监食检规〔2023〕1号市场监管总局关于规范食品快速检测使用的意见

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中的甲拌磷经提取后与胶体金标记的特异性抗

体结合，抑制了抗体和试纸条中检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的

变化。通过检测线与质控线（C线）颜色深浅比较，对样品中甲拌磷进行定性判定。

5试剂与材料

除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。

5.1试剂

5.1.1甲醇（CHOH）。

3

5.1.2稀释液：由胶体金免疫层析试纸条配套提供，或按照其说明书配制。

5.1.3参考物质：甲拌磷参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分

子质量见表1，纯度≥98%。

表1甲拌磷参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量

中文名称英文名称CAS登录号分子式相对分子质量

甲拌磷Phorate298-02-2CHOPS260.4

71723

注：或等同可溯源物质。

1

5.2溶液配制

5.2.1甲拌磷标准储备液（100μg/mL）：准确称取甲拌磷参考物质（5.1.3）1mg（精确至

0.01mg），置于小烧杯中，用甲醇（5.1.1）溶解，定量转移至10mL容量瓶中，再用甲醇

（5.1.1）定容，摇匀，配制成浓度为100μg/mL的甲拌磷标准储备液。-20℃避光保存，有

效期6个月。

5.2.2甲拌磷标准工作液（1μg/mL）：精密移取甲拌磷标准储备液（100μg/mL）（5.2.1）

0.1mL，置于10mL容量瓶中，用甲醇（5.1.1）定容，摇匀，配制成浓度为1μg/mL的甲拌

磷标准工作液。临用新配。

5.3材料

甲拌磷胶体金免疫层析试纸条，适用基质为中药材。需在阴凉、干燥、避光条件下保存。

6仪器与设备

6.1电子天平：感量为0.01g和0.01mg。

6.2均质器。

6.3离心机。

6.4氮吹仪。

6.5涡旋仪。

6.6移液器：10μL～200μL、100μL～1000μL。

6.7迷你金属浴。

6.8胶体金读数仪（可选）。

7分析步骤

7.1试样制备

取适量有代表性样品，充分均质混匀。

7.2试样提取

称取1g试样（精确至0.01g）放入离心管中，加入3mL甲醇（5.1.1），上下振荡30s，

3000r/min以上离心3min；取1.0mL上清液至离心管中，50~60℃水浴氮气流下吹干；加入

0.5mL稀释液（5.1.2），涡动20s后即为待测液。

7.3测定步骤

测试前，将未开封的试纸条恢复至室温。吸取100μL样品待测液于试纸条的加样孔中，

室温反应10min后，直接进行结果判定。

注1：测定步骤建议按照试纸条说明书。

注2：结果判定可使用胶体金读数仪，读数仪的具体使用参照仪器使用说明书。

7.4质控试验

2

每批样品应同时进行空白试验和加标质控试验。

7.4.1空白试验

称取空白试样，按照7.2和7.3步骤与样品同法操作。

7.4.2加标质控试验

准确称取空白试样1g（精确至0