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脊髓全横断损伤后差异表达蛋白的蛋白质组学分析的开题报告

一、研究背景和意义

脊髓全横断损伤（SCI）是一种常见的神经损伤，其具有严重的临床后果。SCI会导致患者下肢瘫痪、行走和运动功能丧失、疼痛和自主神经功能紊乱等障碍。SCI发生后，中枢神经系统的应激反应、炎症反应等多种反应都会发生，导致神经细胞凋亡、轴突断裂、胶质细胞反应增强等损害。尽管一些高效的治疗手段不断被引入到临床治疗中，但是SCI的发病机制及其治疗方法仍然需要进一步研究。

蛋白质组学是一种重要的高通量技术，可用于发现SCI的生物标志物、研究SCI损伤的分子机制。近年来，蛋白质组学在SCI中的研究较少，仅仅是一些定性分析。为了更好地揭示SCI发生的复杂机制，并开展更有效的治疗手段，需要对SCI损伤后差异表达的蛋白进行系统分析，这正是本研究的目的。

二、研究方法

本研究将采用以下方法：

1.动物模型构建：雄性Sprague-Dawley大鼠，体重200~250g，随机分为正常组和SCI组；

2.样本采集：在SCI组中，采用标准方法使大鼠发生SCI，并在损伤后72h对SCI组和正常组大鼠进行脊髓组织的采集；

3.蛋白质样品制备：

3.1使用SDS分离蛋白质，透彻去除高量蛋白。

3.2使用加偏振剂的蛋白质溶解液，去除非蛋白质物质对检测结果的影响。

4.蛋白质组学分析：采用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）进行蛋白质组学分析，先采用蛋白质酶水解碎裂，得到一系列的肽段后，通过质谱分子量检测，最终获得蛋白质的信息；

5.数据分析：对蛋白质的质谱结果进行分析，包括蛋白质的定性、定量、生物信息网络分析等，最终确定差异表达蛋白质；

6.验证分析：通过Westernblot方法验证差异表达蛋白质。

三、预期结果和意义

通过上述方法，我们期望获得SCI损伤后差异表达蛋白，为进一步了解SCI的机制提供有效的生物信息学依据。这对于SCI的治疗和预后具有重要的理论和实际意义。使用蛋白质组学技术之后，还能进一步利用其优势：深入了解每一个变化的分子，为治疗这些分子造成的神经功能损害提供信息基础。