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序号
实验使用仪器名称
数量
备注
1
可见分光光度计
1
实验使用样品名称
数量
备注
1
红山土壤
7.5g
序号
实验使用药品名称
用量
备注
1
98%浓硫酸溶液
200ml
2
抗坏血酸
0.5g
3
钼酸盐
0.3g
4
酒石酸锑钾
0.350g
5
磷酸二氢钾
0.2197g
6
抗坏血酸溶液
14ml
7
钼酸盐溶液
28ml
8
碳酸氢钠
0.5molL-1
序号
实验使用玻璃器皿等易耗品名称
数量
备注
1
500ml烧杯
1
2
250ml烧杯
2
3
80ml烧杯
1
4
棕色试剂瓶
2
5
1000ml容量瓶
1
6
50ml容量瓶
8
7
100ml容量瓶
1
8
15ml移液管
1
9
10ml移液管
1
10
5ml移液管
1
11
1ml移液管
1
12
比色管
8
13
锥形瓶
6
14
滤纸
3
15
漏斗
3
土壤中有效磷的测定
(0.5molL-iNaHCO3浸提一钼锑抗比色法)
1实验目的及说明
土壤中有效磷的含量,随土壤类型、气候、施肥水平、灌溉、耕作栽培措施等条件的不同而异。通过土壤有效磷的测定,有助于了解近期内土壤供应磷的情况,为合理施用磷肥及提高磷肥利用率提供依据。
土壤速效磷的测定中,浸提剂的选择主要是根据土壤的类型和性质测定。浸提剂是否适用,必须通过田间试验来验证。浸提剂的种类很多,近20年各国渐趋于使用少数几种浸提剂,以利于测定结果的比较和交流。我国目前使用最广学的浸提剂是0.5mol/L-1NaHCO3溶液(Olsen法),测定结果与作物反应有良好的相关性[注1],适用于石灰性土壤、中性土壤及酸性水稻土。此外还使用0.03molL-1NH4F-0.025molL-1HCl溶液(BrayI法)为浸提剂,适用于酸性土壤和中性土壤。
同一土壤用不同的方法测得的有效磷含量可以有很大差异,即使用同一浸提剂,而浸提时的土液比、温度、时间、振荡方式和强度等条件的变化,对测定结果也会产生很大的影响。所以有效磷含量只是一个相对的指标。只有用同一方法,在严格控制的相同条件下,测得的结果才有相对比较的意义。在报告有效磷测定的结果时,必须同时说明所使用的测定方法。
2方法原理
石灰性土壤中磷主要以Ca-P(磷酸钙盐)的形态存在。中性土壤Ca-P、Al-P(磷酸铝盐)、Fe-P(磷酸铁盐)都占有一定的比例。0.5molL-1NaHCO3、(pH8.5)可以抑制Ca2+的活笥,使某些活性更大的与Ca结合的P浸提出来;同时,也可使比较活性的Fe-P和Al-P起水解作用而被浸出。浸出液中磷的浓度很低,须用灵敏的钼蓝比色法测定,其原理详见土壤全磷的测定章节。
当土样含有机质较多时,会使浸出液颜色变深而影响吸光度,或在显色出现浑浊而干扰测定,此时可在浸提排荡后过滤前,向土壤悬液中加入活性碳脱色,或在分光光度计800nm波长处测定以消除干扰。
在酸性条件下,正磷酸盐与钼酸铵、酒石酸反应,生成磷钼杂多酸,被还原剂抗坏血酸还原,则变成蓝色的络合物,通常即称磷钼蓝。
3试剂
本方法所用试剂除另有说明外均应使用符合国家标准或专业标准的分析试剂和蒸馏水或同等纯度的水。
1+1硫酸(H2SO4)。
10%抗坏血酸100g/L溶液:溶解10g抗坏血酸(C6H8O6)于水中,并稀释至100mL。该溶液贮于棕色的试剂瓶中,在约4°C可稳定几周,。如颜色变黄,则弃去重配。
钼锑抗试剂:溶解10.0g钼酸铵(NH4)6Mo7O24?4H2O于300mL约60C水中,冷却。然后将稀H2SO4溶液倒入钼酸铵溶液中,搅匀,再加入100mL0.3%(m/v)酒石酸锑钾(K(SbO)C4H4O7?1/2H2O)溶液。最后用水稀释至2升,盛于棕色瓶中,此为钼锑贮备液。
临用前(当天)称取0.50g抗坏血酸溶于100mL钼锑贮备液中,此为钼锑抗试剂,再室温下有效期为24h,再2?8C冰箱中可贮存7天。
磷标准贮备溶液:将优级纯磷酸二氢钾(KH2PO4)于110干燥2h,在干燥器中放冷。称取0.2197g溶于水,移入1000mL容量瓶中。加(1+1)硫酸5mL,用水稀释至标线。此溶液每毫升含50.0瞄磷(以P计)。本溶液在玻璃瓶中可贮存至少六个月。
磷酸盐标准使用溶液:吸取10.0mL的磷酸盐贮备液于250mL容量瓶中,用水稀释至标线。此溶液每毫升含2.00瞄磷。临时时现配。
0.5molL-1NaHCO3(pH8.5)浸提剂:42.0gNaHCO3溶于约800ml水中,稀释至1L,用浓NaOH调节至pH8.5(用pH计测定),贮于聚乙稀瓶或玻璃瓶中,用塞塞紧。该溶液久置因失去CO2而使pH升高,所以如贮存期超过20天,在使用前必须检查并校准pH值
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