基于UHPLCQTOFMS的当归补血汤治疗2型糖尿病小鼠的代谢组学研究.pptxVIP

基于UHPLCQTOFMS的当归补血汤治疗2型糖尿病小鼠的代谢组学研究

01一、引言三、结果与讨论二、材料与方法参考内容目录030204

一、引言

一、引言2型糖尿病是一种全球性的慢性疾病，对人类的健康和生活质量产生了严重影响。近年来，许多研究致力于寻找有效的治疗策略，包括传统中药。当归补血汤是一种常用的中药方剂，具有补血、养血、活血等功效，被广泛用于临床治疗各种疾病。然而，其对2型糖尿病的治疗作用及其机制尚不清楚。本研究旨在利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱（UHPLCQTOFMS）

一、引言技术，对2型糖尿病小鼠的代谢组学进行研究，探讨当归补血汤的治疗效果及其作用机制。

二、材料与方法

1、材料

1、材料实验动物：健康C57BL/6小鼠，雄性，8周龄，体重18～22g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。

1、材料药品与试剂：当归补血汤（黄芪30g，当归6g），购自北京同仁堂；链脲佐菌素（STZ），购自Sigma公司；甲醇、乙腈（色谱纯），购自德国Merck公司；超纯水，购自北京经科宏达科技有限公司。

1、材料仪器：超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用仪（UHPLCQTOFMS），购自美国ThermoFisherScientific公司。

2、方法

2、方法（1）动物造模与给药健康C57BL/6小鼠随机分为正常组（n=10）和造模组（n=40）。造模组小鼠注射STZ（30mg/kg，ip），正常组注射等体积的柠檬酸缓冲液。72小时后，尾静脉采血检测血糖值，筛选出造模成功的小鼠（血糖≥16.7mmol/L）。将造模成功的小鼠随机分为模型组（n=10）和当归补血汤组（n=10）。

2、方法正常组和模型组给予等体积的生理盐水，当归补血汤组按成人剂量的5倍灌胃给药。连续给药4周后，进行各项指标的检测。

2、方法（2）样品采集与处理给药前及给药后4周，小鼠禁食不禁水12小时，摘眼球取血，离心取血清。采用UHPLCQTOFMS技术对血清样本进行代谢组学分析。色谱柱为AcquityUPLCBEHC18（2.1×100mm，1.7μm），流动相A为0.1%甲酸水溶液，流动相B为乙腈。流速为0.3ml/min，柱温为40℃。进样量为5μl。电喷雾离子源（ESI）

2、方法，正离子模式扫描。通过比较标准品和文献报道的代谢物数据对色谱峰进行鉴定。

2、方法（3）数据分析利用Xcalibur3.0软件对数据进行处理，包括峰识别、峰对齐、数据标准化等。然后利用SIMCA-P+14.1软件进行多元统计分析，包括主成分分析（PCA）、正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）等。通过比较模型组和正常组、当归补血汤组和模型组的代谢物差异，筛选出有统计学意义的差异代谢物。最后，利用MetPA软件进行代谢通路分析。

三、结果与讨论

三、结果与讨论通过UHPLCQTOFMS技术对血清样本进行分析，我们发现模型组和正常组之间存在明显的代谢物差异。模型组小鼠的代谢物谱发生了显著变化，主要表现为氨基酸、脂肪酸、碳水化合物等代谢产物的异常升高或降低。这些代谢物的变化可能反映了2型糖尿病引起的体内代谢紊乱。给予当归补血汤治疗后，这些代谢物的变化得到明显改善或恢复到正常水平。

三、结果与讨论通过比较给药前后的代谢物差异，我们发现当归补血汤可能通过调节糖类、脂肪酸、氨基酸等代谢过程发挥治疗作用。通过代谢通路分析，我们发现当归补血汤可能主要通过影响核苷酸生物合成、脂肪酸氧化等过程发挥治疗作用。然而，需要进一步的研究来验证这些发现是否具有临床应用价值。此外，本研究的样本量较小，可能存在一定的偏差。未来研究可以扩大样本量，以增加研究的可靠性。

三、结果与讨论本研究仅了代谢物的变化，未涉及相关基因和蛋白质的表达水平。未来研究可以利用基因测序和蛋白质组学等技术进一步探讨当归补血汤治疗2型糖尿病的作用机制。

参考内容

内容摘要当归补血汤是一种传统的中药方剂，由当归和黄芪组成，具有补血、益气、固表等功效。然而，其具体的物质基础和作用机制仍不清楚。为了更深入地了解当归补血汤的补血功效及其作用机制，本次演示采用多组学方法进行研究。

1、细胞实验

1、细胞实验将人脐带血单个核细胞（PBMC）分为4组，分别给予不同浓度的当归补血汤处理。通过细胞增殖实验、细胞因子和趋化因子释放实验、细胞凋亡实验等方法，观察当归补血汤对PBMC的影响。

2、动物实验

2、动物实验将小鼠随机分为4组，分别给予不同剂量的当归补血汤处理。通过测定小鼠外周血象、骨髓象、血清铁蛋白等指标，观察当归补血汤对小鼠骨髓造血功能的影响。

3、生物信息学分析

3、生物信息学分析通过多组学技术对实验数据进行深入分析，发现当归补血汤对细胞凋亡、细胞周期、自噬等信号通路的调节作用。通过STRING、miRtap等