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牛海绵状脑病之试验室诊断技术

*导读：BSE的诊断以组织病理学为主，并至少应协作免疫

组织化学染色法或西方免疫墨点法或酵素连结免疫吸附分析法

等其中一种检验方能进展确诊.……

一、简介

牛海绵状脑病(bovinespongiformencephalopathy,

BSE)，俗称狂牛病(madcowdisease)，是一种引起牛致死性的

传染性神经退行性疾病。1985年4月在英国首次观看到牛有特别

的临床病症，于1986年诊断出病原，其病原不是传统的细菌或

病毒等，但却有感染力，称之为变性普里昂蛋白质(scrapie

prionprotein,PrPsc)。

目前认PrPsc会将神经细胞内正常的PrPc转化成PrPsc，

而以等比级数的速度累积在神经细胞内，而造成神经细胞死亡，

终使脑组织变成海绵样，所以是一种造成动物致死性神经变性的

疾病，统称为传播性海绵状脑病(transmissiblespongiform

encephalopathies,TSE)或普里昂疾病(priondiseases)，在

人引起库贾氏症(Creutzfeldt-JakobDisease,CJD)、kuru症、

Gerstmann-Straussler-Scheinker症候群(GSS)及致死性家族

性失眠症(fatalfamilialinsomnia,FFI)等，在牛引起BSE，

在羊引起搔痒症(scrapie)，在貂引起传染性貂脑病

(transmissibleminkencephalopathy,TME)，在鹿与麋鹿引起

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慢性消耗病(chronicwastingdisease,CWD)，在猫、狮、豹

引起猫科海绵状脑病(felinespongiformencephalopathy,

FSE)，很多动物皆有类似的疾病，在受感染宿主会形成脑组织的

海绵状变性与神经胶细胞增生等病变。疾病之致病机序各有所不

同，目前的争论显示BSE的爆发可能是牛饲料添加之肉骨粉中

含有大量的羊搔痒症病原所致。

此外，近年的争论显示觉察导致BSE的病原与发生在人类的

变异型库贾氏症(variantCJD)有关，所以将BSE的病原假定

会染给人类。自从英国爆发BSE之后，至2023年止很多国家包

括：奥地利、比利时、捷克、丹麦、芬兰、法国、德国、希腊、爱

尔兰、意大利、日本、列支敦斯登、卢森保、荷兰、波兰、葡萄

牙、斯洛伐克、斯拉维尼亚、西班牙、瑞士等国也间续有病例发

生，尤其是2023年日本有三个确诊病例，表示本病已由欧洲地

区集中至亚洲地区，所幸国内迄今未有病例报告。

因此了防范BSE入侵我国，确保国民安康及畜牧产业之永

续进展，亟需建立国内BSE诊断技术及诊断试验室，故笔者等

于2023年7月28日至8月11日赴美国「国家普里昂疾病病理

诊断中心」，2023年11月18日至23日承受国际畜疫会之邀请

赴泰国参与「区域性牛海绵状脑病诊断与监测研习会」，研习

BSE相关诊断技术，目前已符合国际畜疫会订定之诊断标准，建

立本病之试验室生物安全、组织病理学诊断、免疫组织化学染色

法、西方免疫墨点法及酵素连结免疫吸附分析法等诊断流程并持

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续进展本病之监控打算。

二、现行诊断方法

BSE的诊断以组织病理学为主，并至少应协作免疫组织化学染

色法或西方免疫墨点法或酵素连结免疫吸附分析法等其中一种

检验方能进展确诊，兹将已建立之试验室诊断方法详述如后：

(一)组织病理学诊断法

将采集的牛脑组织置于10%中性福尔马林液固定完全后，

取大脑、小脑及脑干共十个部位的脑组织，其重点部位为延脑

(medullaoblongata)成“V“字形尖端的闩(obex)，修整为约

4mm的厚度，放入脱水包埋盒中，再浸泡于98%的蚁酸中1小时(

将具感染力气的prion不活化)，然后再浸泡于10%中性福尔马

林液中2天。再依一般例行之病理切片方法，将组织块脱水、石

蜡浸润、石蜡包埋等步骤，制作成3-5m厚之切片，脱蜡后以

HE染色及