SNT 2539-2010动物源食品中乙氧喹啉残留量的测定方法 高效液相色谱法.docxVIP

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SN/T2539—2010

前言

本标准的附录A、附录B和附录C均为资料性附录。

本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国湖南出入境检验检疫局

本标准主要起草人：颜鸿飞、张莹、孙菲、胡宇东、黄志强、付善良、李拥军、王美玲

本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。

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SN/T2539—2010

动物源食品中乙氧喹啉残留量的

测定方法高效液相色谱法

1范围

本标准规定了猪肉、猪肝、猪肾、鸡肉、鱼肉、鸡蛋、蜂蜜、牛奶中乙氧喹啉残留量的液相色谱测定和

高效液相色谱-质谱确证方法。

本标准适用于猪肉、猪肝、猪肾、鸡肉、鱼肉、鸡蛋、蜂蜜、牛奶中乙氧喹啉残留量的测定和确证。

2方法提要

试样加入碳酸钠溶液和丙酮振荡提取后，用正己烷进行液-液萃取分配，提取液经浓缩定容后，用配

荧光检测器的高效液相色谱仪测定，外标法定量，高效液相色谱-串联质谱仪确证。

3试剂和材料

除特殊注明外，所有试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。

3.1丙酮：HPLC级。

3.2正己烷：HPLC级。

3.3乙腈：HPLC级。

3.4碳酸钠。

3.5乙酸铵：色谱纯。

3.6碳酸钠溶液(100g/L):准确称取100g碳酸钠(3.4)于烧杯中加入适量水溶解，转移至1L容量瓶，定容至刻度，摇匀。

3.7乙酸铵溶液(20mmol/L):称取1.54g乙酸铵(3.5),溶解于1L水中。

3.8乙氧喹啉标准物质(ethoxyquin,CAS编号：91-53-2,C?HgNO):纯度大于等于98.0%。

3.9乙氧喹啉标准储备溶液：准确称取适量标准品，用乙腈稀释配制成100μg/mL的标准储备液，0℃~4℃下暗处保存。

3.10乙氧喹啉标准工作液：根据检测需要移取一定体积的标准中间溶液用乙腈逐级稀释成适当浓度的标准工作溶液。标准工作溶液需现配现用。

4仪器和设备

4.1.高效液相色谱仪；配有荧光检测器(FLD)。

4.2高效液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子化源(ESI)。

4.3组织捣碎机。

4.4离心机：6000r/min。

4.5涡旋混匀器。

4.6旋转蒸发仪。

4.7分析天平：感量0.0001g和0.01g。

4.8氮气浓缩仪。

4.9有机滤膜：0.45μm。

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5试样制备与保存

5.1试样制备

5.1.1肉及动物内脏

取有代表性样品500g,将其切碎后，用组织捣碎机将样品加工成浆状，混匀，装入洁净的盛样容器

内，密封并标明标记。

5.1.2蜂蜜及牛奶

取有代表性样品500g,倒人洁净的搪瓷混样桶中，充分搅拌均匀，装入洁净的盛样容器内，密封并

标明标记。

5.2试样保存

蜂蜜试样于4℃保存；牛奶、肉及内脏制品等试样于一18℃下冷冻保存。在制样的操作过程中，应

防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

6测定步骤

6.1提取与净化

称取2g均匀试样(精确至0.01g)于50mL具塞离心试管中，加入5mL碳酸钠溶液(3.6)置于涡旋混匀器上混匀2min,加入5mL丙酮(3.1)置于涡旋混匀器上振荡2min,加入15mL正己烷(3.2)在涡旋混匀器振荡提取2min,6900r/min离心3mtm,取士层正已烷层于200mL鸡心瓶中，用15mL正己烷再重复提取两次，合并正己烷层于鸡心瓶中，将提取液于30℃水浴下旋转浓缩至约1mL,用平缓氮气流吹至近干，用乙腈溶解并定容至1.0mL,过滤膜后供高效液相色谱仪测定和高效液相色谱-串

联质谱仪确证。

6.2测定

6.2.1高效液相色谱测定条件

a)色谱柱：Ca,150mm×4/6mm(内径)/5μm,或相当者；

b)色谱柱温度：25℃;

c)流动相：乙酸铵水溶液(20mmol/L)子乙腈=(7+3)(V/V);

d)荧光检测器：激发波长360nm,发射彼长435nm;

e)流速：0.50mL/min;

f)进样量：10μL。

6.2.2高效液相色谱-串联质谱仪测定条件

6.2.2.1高效液相色谱条件

a)色谱柱：Cg,150mm×4.6mm(内径)5μm或相当者；

b)色谱柱温度：25℃;

c)流速：0.50mL/min;

d)梯度洗脱程序：见表1;

表1高效液相色谱-串联