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牛磺鹅去氧胆酸对糖皮质激素受体的激活作用

李磊;刘畅;毛伟;关红;何秀玲;李培锋

【摘要】旨在研究牛磺鹅去氧胆酸(taurochenodeoxycholicacid,TCDCA)对糖皮质激素受体(glucocor-ticoidreceptor,GR)的活化作用，进而阐明TCDCA作用机制.采用分子对接模拟TCDCA与GR的结合情况，并通过构建含有GFP标签的GR真核表达质粒，经瞬时转染HEK-293T细胞，观察TCDCA对GR核移位的影响结果表明TCDCA(1mmol/L)可与GR发生结合并激活GR,产生核移位，证明TCDCA抗炎免疫调节作用与其活化GR信号通路相关.

【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷)，期】2019(040)007【总页数】5页(P82-86)【关键词】牛磺鹅去氧胆酸;糖皮质激素受体;分子对接【作者】李磊;刘畅;毛伟;关红;何秀玲;李培锋

【作者单位】安徽科技学院动物科学学院/农业农村部猪肉质量安全控制重点实验室安徽凤阳233100;内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室，内蒙古呼和浩特010018;安徽科技学院动物科学学院/农业农村部猪肉质量安全控制重点实验室，安徽凤阳233100;内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室，内蒙古呼和浩特010018;内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室，内蒙古呼和浩特010018;内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室，内蒙古呼和浩特010018;内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验

室，内蒙古呼和浩特010018;内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊

疗技术重点实验室，内蒙古呼和浩特010018【正文语种】中文

【中图分类】S852.33;S859.791

胆汁酸(bileacids，BAs)是动物胆汁的主要活性成分，除了具有乳化脂肪、增加脂肪酶活性及促进胆汁分泌等生理作用外，还具有明显的抗炎和免疫调节作用。牛磺鹅去氧胆酸(taurochenodeoxycholicacid，TCDCA)广泛存在于多种动物胆汁中，包括鸡、鸭、鹅、牛、绵羊、蛇等，是鹅去氧胆酸(chenodeoxycholicacid,CDCA)与牛磺酸(taurine,Tau)结合而成的结合型BAs［1］。大量研究表明，TCDCA对多种原因(包括物理、化学、细菌等因素)引起的急慢性炎症反应均有明显的抑制作用［2-3］。随着研究的深入，越来越多的研究证实BAs可作为信号分子，参与细胞内信号通路转导，发挥抗炎、免疫调节和营养物质代谢等作用［4-5］。

BAs发挥抗炎免疫调节作用主要是通过与机体内某些受体结合，并激活相应受体而发挥的。BAs在体内的天然受体主要包括两大类，一类是细胞膜受体，另一类是细胞核受体。糖皮质激素受体(glucocorticoidreceptor，GR)作为一种核受体，被激活后能够发挥强烈的抗炎作用，GR发生核移位被认为是GR活化的标志［6］。研究表明，牛磺熊去氧胆酸(tauroursodeoxycholicacid，TUDCA)、熊去氧胆酸(ursodeoxycholicacid,UDCA)等BAs均可结合并激活GR而表现出强烈的抗炎作用［7］，GR可能是BAs的抗炎作用靶点。

通过TCDCA与可的松结构式对比(图1)可知，TCDCA与其主要结构十分相似，均含有3个环己烷与1个环戊烷稠合而成的环戊烷多氢菲(甾核)的基本结构。据此推测,TCDCA抗炎免疫调节作用机制可能与GCs相同或相似。为了验证这一假设，本研究采用分子对接以及观察GR核移位的方法对TCDCA激活GR的作用开展了相关研究，为揭示TCDCA的分子作用机制奠定基础。

A.可的松；B.TCDCA

A.Cortisone;B.TCDCA

图1TCDCA与可的松结构式比对

Fig.1MolecularstructuresofcortisoneandTCDCA

1材料与方法

1.1材料

TCDCA（纯度＞98%）、地塞米松，美国Sigma公司产品；HindB、KpnI、dNTPMixture、PrimeSTARoRHSDNAPolymerase、T4DNALigase,宝生物工程（大连）有限公司产品；无内毒素质粒大提试剂盒，北京天根公司产品；胶回收纯化试剂盒，Axygen公司产品；DMEM高糖细胞培养液、LipofectamineoR2000转染试剂，美国Life公司产品；pEGFP-C1载体，内蒙古农业大学张月梅博士惠赠;pBIND-GR，美国Promega公司产品；