SN 1354-2004进出口蜂蜜中咖啡因含量检验方法 液相色谱法.docxVIP

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T1354—2004

进出口蜂蜜中咖啡因含量检验方法液相色谱法

Determinationofcaffeineinhoneyforimportand

export—Liquidchromatography

2004-12-01实施2004-06-01

2004-12-01实施

发布中华人民共和

发布

国家质量监督检验检疫总局

I

SN/T1354—2004

前言

本标准的附录A为资料性附录。

本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本标准由中华人民共和国湖南出入境检验检疫局负责起草。

本标准主要起草人：戴华、李拥军、熊芳、李献坤、黄志强、袁智能。

本标准系首次发布的检验检疫行业标准。

1

SN/T1354—2004

进出口蜂蜜中咖啡因含量检验

方法液相色谱法

1范围

本标准规定了进出口蜂蜜中咖啡因含量检验的抽样、制样和液相色谱测定方法。

本标准适用于进出口蜂蜜中咖啡因含量的检验。

2抽样和制样

2.1检验批

以不超过1000件(或25t)为一检验批。

同一检验批的商品应具有相同的特性，如包装、标记、产地、规格和等级等

2.2抽样数量

抽样数量见表1。

单位为件表1

单位为件

批量

最低抽样数

1～10

1

11～50

5

51～100

10

101～500

每增加100,增取5

501以上

每增加100,增取2

2.3抽样工具

2.3.1取样管：不锈钢管，长约115cm,内径约2.5cm;玻璃管，长约115cm,内径约2.5cm。

2.3.2混样器：搪瓷桶(或杯)。

2.3.3样品瓶：500mL具塞广口玻璃瓶。

2.4抽样方法

按2.2规定的抽样件数随机抽取，逐件开启。将玻璃管缓缓从开口处放入直至桶底，吸取样品。如遇蜂蜜结晶，用不锈钢管缓缓插入，直至桶底，吸取样品。每件抽取样品不少于100g作为原始样品将所取样品倾人混样器内，混合均匀，分出约1kg,装入清洁干燥的样品瓶内，加封后，标明标记，及时

送交实验室。

如属瓶装蜂蜜，按应开件数，从每件中随机取一瓶，标明标记，及时送交实验室。

2.5试样制备

将取回样品充分搅匀，均分成两份，装入试样瓶中作为试样，密封，标明标记。

如取回样品中有结晶析出，则将样品瓶加盖后，置于不超过40℃的水浴中温热。待结晶全部融化

后，启盖，充分搅匀，均分成两份，密封，并标明标记。

如属瓶装蜂蜜，将取回的全部蜂蜜，倒在一起，充分搅匀，分取出约1kg代表性样品。再将1kg代

表性样品经搅匀后，均分成两份，装人试样瓶中作为试样，密封，标明标记。在抽样和制样的操作过程

2

SN/T1354—2004

中，应防止样品受到污染或发生含量的变化。

2.6试样保存

将试样于室温下保存。

3测定方法

3.1方法提要

样品中咖啡因在碱性条件下，用三氯甲烷提取，提取液经净化、浓缩后，用配有紫外检测器的液相色

谱仪测定，外标法定量。

3.2试剂和材料

所有试剂除特殊注明外，均为分析纯，水为重蒸馏水。

3.2.1乙腈：液相色谱纯或相当者。

3.2.2冰乙酸：99.9%。

3.2.3三氯甲烷。

3.2.4氢氧化钠水溶液：称取5.0.g氢氧化钠用100mL水溶解。

3.2.5咖啡因：纯度≥99.5%。

3.2.6标准溶液(1mg/mL):准确称取0.1g(准确至0.0001g)咖啡因标准品，用水溶解并定容至100mL,作为标准储备液。再根据需要用水将标准储备液稀释至适当浓度。

3.3仪器和设备

3.3.1高效液相色谱仪配紫外检测器。

3.3.2旋涡混匀器。

3.3.3离心机：4000r/min。

3.3.4多功能微量化样品处理仪或类似者。

3.4测定步骤

3.4.1提取、净化

准确称取20g(准确至0.01g)试样于50mL具塞离心管中，加入10mL氢氧化钠水溶液混匀，然后定量加入20.0mL三氯甲烷，加塞，在旋涡混匀器上混匀5min,于2000r/min离心5min,将上层水相用尖嘴吸管吸取弃去，有机相再用2×5mL氢氧化钠水溶液洗涤两次，弃去水相；将有机相在旋涡混合器上混匀，用干燥滤纸过滤，弃去初液3mL,收集滤液，定量取滤液10.0mL,于45℃空气流下浓缩

至近干，定量加入2.0mL水溶解残渣，过0.45μm微孔滤膜后，上液相色谱仪测定，外标法定量。

3.4.2测定

3.4.2.1色谱条件

a)色谱柱：ODSC18柱，25cm×4.6