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2.分子扩散项B=2γDgγ:组分分子在柱内扩散路径的弯曲程度有关的弯曲因子Dg:试样组分在流动相中的扩散系数(cm2·s-1)填充柱色谱:γ=0.5~0.7毛细管柱:γ=1流速↓,滞留时间↑,扩散↑扩散系数:Dg∝M流动-1/2M流动↑M组分↑→B值↓Dg∝TempTemp↓分子扩散项系数3.传质阻力项C=Cg+Cl气相传质阻力:是指组分分子由气相移动到气液两相界面进行交换,这一传质过程中所受到的阻力。固定相颗粒越小dp↓,Cg↓;Dg↑,Cg↓气-液色谱:Dl为组分在液相中的扩散系数,Dl↑,Cl↓液相传质阻力:组分分子由气液两相界面扩散至固定液内部,进行质量交换达到分配平衡后,再返回气液两相界面的传质过程中所受到的阻力。df为固定相液膜厚度,df↓,Cl↓讨论:影响柱效的因素1)被分离组分在色谱柱内的涡流扩散、分子扩散及传质阻力是造成色谱峰扩展,柱效下降的主要原因。3)通过选择适当的固定相粒度、载气种类、液膜厚度及载气流速可提高柱效。2)速率理论为色谱的分离和操作条件的选择提供了理论指导。阐明了流速和柱温对柱效及分离的影响。*4)各种因素相互制约,如载气流速增大,分子扩散项的影响减小,使柱效提高,但同时传质阻力项的影响增大,又使柱效下降;柱温升高,有利于传质,但又加剧了分子扩散的影响,选择最佳条件,才能使柱效达到最高。*5).载气流速与柱效——最佳流速载气流速高时:传质阻力项是影响柱效的主要因素,流速?,柱效?。载气流速低时:分子扩散项成为影响柱效的主要因素,流速?,柱效?。H-u曲线与最佳流速:由于流速对这两项完全相反的作用,流速对柱效的总影响使得存在着一个最佳流速值,即速率方程式中塔板高度对流速的一阶导数有一极小值。以塔板高度H对应载气流速u作图,曲线最低点的流速即为最佳流速。*分子扩散项和传质阻力项对板高的贡献*薄层色谱和纸色谱可以检测出ppt(10-9)级甚至ppb(10-12)三、色谱法的特点1.分离效率高复杂混合物、性质相近的有机同系物及旋光异构体等2.灵敏度高4.应用范围广可分析有机或无机的气、液、固体试样组分的定性较为困难缺点:3.分析速度快解决方法:发展联用技术§15-2色谱分离原理一、分离原理固定相是多孔性的固体吸附剂颗粒,其分离是基于固体吸附剂对试样中各组分的吸附能力的不同;1.气固色谱:固定相由担体和固定液所组成,固定液涂敷在担体表面,其分离混合物是基于固定液对试样中各组分的溶解能力的不同。2.气液色谱:试样中的各组分K值不同是分离的基础二、分配系数和分配比1.分配系数K在一定温度和压力下,组分在两相间分配达到平衡时的浓度比,称为分配系数。一定温度和压力下,K越大,出峰越慢*式中VM为色谱柱中流动相体积;VS为色谱柱中固定相体积;β称为相比2.分配比k(容量因子)在一定温度和压力下,组分在两相间分配达到平衡时,分配在固定相和流动相中的总量之比。三、气相色谱流出曲线1.基线色谱柱中仅有流动相通过检测器时,所检测到的信号。2.峰高从色谱峰顶点到基线之间的垂直距离。3.区域宽度2)半峰宽(Y1/2)3)峰底宽(Y)色谱峰高一半处的宽度(GH).2.354δ色谱峰两侧拐点上的切线在基线上截距之间的距离(IJ)。4δ1)标准偏差δ,0.607峰高处峰宽的一半,EF/2气相色谱流出曲线4.保留值1)用时间表示的保留值保留时间(tR):组分从进样到柱后出现浓度极大值时所需的时间。不与固定相作用的组分(气体)的保留时间。调整保留时间(tR):tR=tR-tM死时间(tM):tM=L/u2)用体积表示的保留值组分从进样到柱后出现浓度极大值时所通过的流动相体积F0:流动相体积流速VR=tR×F0色谱柱内未被固定相占据的空隙体积调整保留体积(VR):VR=VR-VM死体积(VM):VM=tM×F0保留体积(VR):tR=tM(1+k)VR=VM(1+k)3)相对保留值r21又称选择性因子,只与柱温和固定相性质有关,表示了固定相对这两种组分的选择性6.保
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