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ICS65.020.20
CCSB16
15
内蒙古自治区地方标准
DB15/T3380—2024
马铃薯镰刀属真菌病害检测技术规程
Technicalcodefordetectionoffusariumfungidiseaseinpotato
2024-03-15发布2024-04-15实施
内蒙古自治区市场监督管理局发布
DB15/T3380—2024
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
本文件由内蒙古自治区农牧厅提出。
本文件由内蒙古自治区马铃薯标准化技术委员会(SAM/TC40)归口。
本文件起草单位:内蒙古自治区农牧业科学院,内蒙古农业大学,乌兰察布市农林科学研究所、内
蒙古自治区农牧业技术推广中心、喀喇沁旗农牧局、武川县农牧技术推广中心。
本文件主要起草人:赵远征、徐利敏、王东、周洪友、邱廷艳、张晓明、王真、王玉凤、贾瑞芳、
谢锐、邱鑫泽、牟英男、陈文晋、肖皓文、张宇。
I
DB15/T3380—2024
马铃薯镰刀属真菌病害检测技术规程
1范围
本文件规定了马铃薯镰刀属真菌病害检测的原理、仪器设备和用具、形态检验、致病性测定、PCR
检验、样品复检等技术要求和方法。
本文件适用于马铃薯镰刀属真菌病害的检测。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
SN/T2729马铃薯炭疽病菌检疫鉴定方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4原理
镰刀属真菌(Fusariumspp.)是一种重要的植物病原菌,属无性真菌类,有性时期为子囊菌门。镰
刀属真菌主要危害马铃薯植株和块茎。本标准以病原菌在植株和块茎上的危害症状,菌落、孢子等形态
学特征,回接致病性测定及PCR反应结果为鉴定依据,将上述各项措施综合形成一套检测技术体系。
5仪器设备和用具
仪器设备
超净工作台、显微镜、高压灭菌锅、光照培养箱、PCR仪、离心机、凝胶电泳仪、漩涡震荡仪、水
浴锅、凝胶成像系统、分析天平。
检测工具
接种针、手术刀、镊子、挑针、载玻片、盖玻片、滴管、离心管、培养皿、三角瓶、酒精灯。
6形态检验
调查取样
选取田间萎蔫、干枯发病植株,观察根部腐烂情况,检查是否褐变或出现白色菌丝体;剖开根茎处
维管束观察是否出现黄化或褐变;田间或窖藏观察马铃薯块茎病变情况,在块茎脐部下方2cm左右处横
1
DB15/T3380—2024
切,或切取表皮凹陷病斑处进行观察,观察是否出现维管束褐变,块茎中空或腐烂并伴随白色菌丝层。
将具有典型特征的病株、病薯取样。
病原菌分离培养和纯化
将病样表面清洗晾干,选择病斑附近的病健交界处,切取0.3cm×0.3cm×0.1cm大小的薄片,75%
酒精消毒30s,用无菌滤纸吸干,在0.1%次氯酸钠浸泡2min,再用无菌水冲洗3次。待组织干燥后置于
PDA培养基上,在25℃恒温下光照、黑暗交替各12
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