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紫花苜蓿盐诱导基因的筛选与克隆的任务书

任务书

题目：紫花苜蓿盐诱导基因的筛选与克隆

背景：盐胁迫是植物发育中最常见的一种非生物胁迫，盐胁迫容易造成植物的生长发育受阻，影响生产力和质量，因此，对于植物适应盐胁迫的分子机制的研究具有极其重要的意义。遗传学研究发现，某些基因对植物的适应盐胁迫有重要的作用。因此，筛选和克隆这些适应盐胁迫的基因对于揭示植物适应盐胁迫的分子机制具有重要的研究价值。

研究目的：本研究旨在利用PCR技术筛选和克隆紫花苜蓿盐诱导基因，为进一步研究植物适应盐胁迫的分子机制提供基础。

研究内容：

1.筛选盐诱导基因：通过将紫花苜蓿种子浸泡于含50mMNaCl溶液中，处理相应时间段后，收集不同时期的根和叶样品，提取总RNA，并采用RT-PCR技术对样品中的盐诱导基因进行筛选。

2.克隆盐诱导基因：利用PCR技术对盐诱导基因进行克隆，并对所克隆的基因进行测序和分析。

3.生物信息学分析：借助生物信息学分析，对所得基因序列进行比对，预测基因的结构和功能。

研究计划：

第一年：收集紫花苜蓿不同处理时期的根和叶样品，提取总RNA，进行RT-PCR筛选盐诱导基因。确定盐诱导基因的克隆方法及PCR扩增条件。

第二年：对盐诱导基因进行克隆，将其基因克隆到适当的表达载体中，进行功能分析。通过计算机分析和生物实验的方法，研究盐诱导基因在植物适应盐胁迫中的作用机制。

第三年：对克隆得到的基因进行进一步的生物学分析，包括其表达水平和对盐胁迫的响应情况等方面的研究。同时，对基因的序列信息和结构进行生物信息学分析，探讨其在植物适应环境胁迫中的作用机制。

预期成果：

1.成功筛选和克隆紫花苜蓿盐诱导基因，连接至表达载体中并获得高效的重组蛋白。

2.部分克隆得到的基因可在适应盐胁迫环境下提高植物对盐离子的耐受能力。

3.对植物适应盐胁迫的分子机制有所探索，对深入研究植物适应盐胁迫的分子机制提供理论基础。

主要参考文献：

1.Xiong,L.,andZhu,J.K.(2002).MolecularandGeneticAspectsofPlantResponsestoEnvironmentalStress.MendelNewsletter11(1).

2.Munns,R.(2002).ComparativeAnalysisofSaltToleranceamongCropsandModelSpecies.AnnalsofBotany70(Supplement1),757–773.

3.Roy,S.J.,andWu,R.(2002).SaltStressinMaize:Effects,ResistanceMechanisms,andManagement.Agriculture,EcosystemsandEnvironment98,261–275.

4.Zhu,J.,Hoekenga,O.,andRen,Z.(2004).DoesArabidopsisfbx26playaroleinsaltstressresponse?PlantSignalBehav6:14799-1530.

5.Wang,Y.,Shi,Y.andLi,W.(2003).PurificationandcharacterizationofNPR1anditsroleinregulatinggeneexpressionduringsaltstressinArabidopsis.PlantPhysiology,131,1913-1921.