色谱法测定药物含量的计算.ppt

色谱法测定药物含量的计算制作单位：沧州医学高等专科学校制作人：刘清新一、色谱法测定药物含量常用的方法1、外标法以被测物质的纯品作为对照品，在相同色谱条件下，以对照品和样品的响应信号进行比较定量的方法。2、内标法以非被测物的另一物质的纯品作为内标物，加入到准确称量的试样中，根据被测物和内标物的质量以及相应峰面积比与相对响应值，测定待测组分含量的方法。（一）外标法按各品种项下规定，精密称（量）取对照品和供试品，分别配成对照品溶液和供试品溶液，分别精密取一定量，注入仪器，记录色谱图，测量对照品溶液和供试品溶液中待测成分的峰面积（或峰高），计算供试品溶液的浓度。计算公式：1.原料药含量计算二、色谱法测定药物含量的计算实例解析实例1：高效液相色谱外标法测定盐酸环丙沙星（C17H18FN3O3?HCl?H2O）的含量及结果计算。规定：按无水物计算，含C17H18FN3O3不得少于88.5%测定方法：色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol/L枸橼酸溶液-乙腈（82∶18）用三乙胺调节pH至3.5为流动相，流速为1ml/min，柱温30℃，检测波长为277nm，理论板数按环丙沙星峰计算不低于2000，环丙沙星峰和相邻杂峰间分离度应符合要求。供试品的测定精密称取本品51.24mg，置100ml量瓶中，加流动相使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取环丙沙星对照品51.07mg，同法测定。已知：本品的水分为2.0%，对照品水分为1.8%。测定数据：AR＝14325，AX＝13004；mx＝50.24mg；mR＝51.07mg。实例解析实例1：高效液相色谱外标法测定盐酸环丙沙星（C17H18FN3O3?HCl?H2O）的含量及结果计算。解析：盐酸环丙沙星含量%=结果：符合规定（规定：按无水物计算，含C17H18FN3O3不得少于88.5%）。2.片剂含量测定与计算实例解析实例2：高效液相色谱外标法测定三唑仑片的含量及结果计算。规定：本品含三唑仑（C17H12Cl2N4）应为标示量的90.0%～110.0%测定方法：色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（55∶45）为流动相；检测波长为220nm，理论板数按三唑仑峰计算不低于2000。供试品溶液：取本品（规格:0.25mg/片）50片，称定总重量为0.2010g，研细，精密称取细粉0.09811g，置100ml量瓶中，精密加50%甲醇溶液稀释至刻度，滤过，取续滤液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取三唑仑对照品12.10mg，置100ml量瓶中，精密加50%甲醇溶液稀释至刻度（必要时超声处理），同法测定。实例2：高效液相色谱外标法测定三唑仑片的含量及结果计算。测定数据：AR＝9636，AX＝5137，W50＝0.2010g，ms＝0.09811g。已知：标示量为0.25mg/片。解析：结果：符合规定[规定：本品含三唑仑（C17H12Cl2N4）应为标示量的90.0%～110.0%]。3.注射液含量计算实例解析实例3：高效液相色谱外标法测定己酸羟孕酮注射液的含量及结果计算。测定方法：色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（85∶15）为流动相；检测波长为254nm，取己酸羟孕酮对照品与戊酸雌二醇对照适量，用甲醇溶解并稀释制成每1ml中各含20μg的混合溶液，进行测试，己酸羟孕酮峰与戊酸雌二醇峰的分离度应符合要求。测定法：用内容量移液管紧密量取本品（规格：2ml:0.25g）2ml置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取己酸羟孕酮对照品适量，用甲醇溶解并定量稀释成20.15μg/ml溶液，同法测定。实例解析实例3：高效液相色谱外标法测定己酸羟孕酮注射液的含量及结果计算。测定数据：AR＝3232，AX＝3648解析：结果：符合规定。[规定：本品含己酸羟孕酮（C27H40O4）应为标示量的90.0%～110.0%]二、内标法按各品种项下的规定，精密称取对照品和内标物质，分别配成溶液，精密量取各溶液，配成校正因子测定用的对照溶液。取一定量注入仪器，记录色谱图。测量对照品和内标物质的峰面积或峰高，按下式计算校正因子f：