2024年人教版高中生物：微生物培养与应用知识点总结.docVIP

专题二微生物的培养与应用课题一微生物的试验室培养

·培养基：人们按照微生物对营养物质的不一样需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，

是进行微生物培养的物质基础。

·培养基按照物理性质可分为液体培养基半固体培养基和固体培养基。在液体培养基中加

入凝固剂琼脂(是从红藻中提取的一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂)后，制成琼脂固

体培养基。微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。根据菌落的特性可以判断是哪一种菌。液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物的分离和鉴

定，半固体培养基则常用于观测微生物的运动及菌种保藏等。

·按照成分培养基可分为人工合成培养基和天然培养基。合成培养基是用成分已知的化学

物质配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于微生物的分离鉴定。天然培养基是用化学

成分不明的天然物质配制而成，常用于实际工业生产。

·按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以克制不需要的微生物生长，增进所需要的微生物的生长。鉴别培

养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药物配制而成的，用以鉴别不

一样类别的微生物。

·培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。

·碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的，物质。如CO?、NaHCO?等无机碳源；糖类、石油、

花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能运用有机碳源。单质碳不能作为碳源。

·氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如N?、NH、NO?、NH?(无机氮源)蛋白质、

氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨(有机氮源)等。只有固氮微生物才能运用N?。

·培养基还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的规定。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性，培养细菌是需要将

pH调至中性或微碱性，培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件

·无菌技术·获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意如下几种方面：

①对试验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。

②将用于微生物培养的器皿、接种用品和培养基等器具进行灭菌。

③为防止周围环境中微生物的污染，试验操作应在酒精灯火焰附近进行。

④试验操作时应防止已经灭菌处理的材料用品与周围的物品相接触。

无菌技术除了用来防止试验室的培养物被其他外来微生物污染外，尚有什么目的?

答：无菌技术还能有效防止操作者自身被微生物感染。

·消毒与灭菌的区别

消毒指使用较为温和的物理或化学措施仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微

生物(不包括芽孢和孢子)。消毒措施常用煮沸消毒法，巴氏消毒法(对于某些不耐高温的

液体)尚有化学药剂(如酒精、氯气、石炭酸等)消毒、紫外线消毒。

灭菌则是指使用强烈的理化原因杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。灭菌措

施有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。

灭菌措施：

①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法；

②玻璃器皿、金属用品等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱；

③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅。

④表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。

比较项

理化原因的作用强度

消灭微生物的数量

芽孢和孢子能否被消灭

消毒

较为温和

部分生活状态的微生物

不能

灭菌

强烈

所有微生物

能

制作牛肉膏蛋白胨固体培养基

(1)措施环节：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。

(2)倒平板操作的环节：

①将，灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。

②右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰。

③用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍不小于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基

(约10～20mL)倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。

④等待平板冷却凝固，大概需5～10min。然后，将平板倒过来放置，使培养皿盖在下、皿

底在上。

·倒平板操作的讨论

1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么措施来估计培养基

的温度?

提醒：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就

可以进行倒平板了。

2.为何需要.使锥形瓶的瓶口通过火焰?

答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。

3.平板冷凝后，为何要将平板倒置?

答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，

既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，导致污染。

4.在倒平板的过程中，假如不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来

培养微生物吗?为何?

答：空气中的微生物也许在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最佳不