和厚朴酚对具核梭杆菌生物被膜的抑制作用研究.docVIP

和厚朴酚对具核梭杆菌生物被膜的抑制作用研究

【摘要】目的：具核梭杆菌作为牙周病的常见病原菌之一，引起了口腔感染性疾病的发生和传播。为了治疗该类疾病，抗生素的滥用使得病菌产生耐药性的问题频发，对人类健康造成危害。因此本课题探究了和厚朴酚对改善和解决具核梭杆菌通过生物被膜发挥作用产生耐药性问题的作用。

方法：以具核梭杆菌作为受试菌株，以和厚朴酚作为受试药，以氯己定作为阳性药对照。首先采用微孔板法构建具核梭杆菌生物被膜体外模型；并通过CCK-8法、结晶紫半定量黏附实验测定生物被膜生长动力曲线和基质总量生长曲线；场发射扫描电子显微镜（SEM）观察生物被膜的微观形态结构，这三种方法验证生物被膜模型构建成功与否。其次，采用微量稀释法测定和厚朴酚对具核梭杆菌生物被膜的最低抑膜浓度（MBIC）；采用CCK-8和结晶紫半定量黏附实验测定和厚朴酚对具核梭杆菌生物被膜代谢活性及基质总量的影响；通过SEM观察药物干预后受试菌株生物被膜的微观结构及形态变化。

结果：根据三种验证方法得知具核梭杆菌受试菌株的生物被膜初始黏附期为0-36h，聚集期为36-48h，成熟期为48-96h。和厚朴酚对具核梭杆菌的最佳药物干预浓度为60μg/mL，中药单体和厚朴酚可在一定程度上降低具核梭杆菌不同阶段形成的生物被膜的代谢活性（P0.05）以及减少生物被膜基质总量（P0.05），破坏生物被膜形态结构，导致菌体死亡