2024-专题五生化药品概论-专题五生化药品概论.pptxVIP

第九章生化药品概述概述生化药物：从生物体别离、纯化所得的一类结构上十分接近于人体内的正常生理活性物质，具有调节人体生理功能，到达预防和治疗疾病目的的物质。来源于生物体特点人体的根本生化成分氨基酸及其衍生物类药物多肽和蛋白质类药物药物的化学本质和化学特性分类酶类药物核酸及其降解物和衍生物类药物糖类药物脂类药物一、生化药品的分类二、生化药物的特点1、原材料复杂同一种生化物质的原料可来源于不同生物体1同一种物质也可由同种生物体不同部位产生2同一种生物体或组织可产生结构完全不同的物质及结构相似物质3胰岛素：猪、牛、人；菘蓝：板蓝根、大青叶；微生物：抗生素、蛋白质、酶等；2、种类多、含量低红豆杉——紫杉醇含量0.003%约从38000棵树中方可别离提纯得到99％纯度的紫杉醇约25kg3、种属特性猪胰岛素牛胰岛素活性低高抗原性低高与人胰岛素结构相似性大小4、活性与空间构象有关5、制备要求高高营养、低含量、特殊生物活性等决定三、传统生化制药的一般工艺过程生物材料的选取与预处理提取有活性局部制剂有效成分的别离与纯化1、材料的选择与保存原那么：选择富含所需目的物、易于获得、提取的无害生物材料1、材料的选择与保存一、材料的选择1、来源：来源丰富、尽量不与其他产品争原料、最好能一物多用，综合利用。2、杂质：难于别离的杂质会增加工艺的复杂性严重影响收率、质量和经济效益。植物SOD血液一、材料的选择3、有效成分的含量〔1〕适宜的生物品种：催乳素，哺乳动物〔2〕适宜的组织器官：〔胃蛋白酶，胃〕〔3〕生物的生长期：胸腺素，幼龄动物〔4〕适宜的种属：人，猪〔5〕适宜的生理状态：胰岛素，饭后二、材料的采集与保存1、天然生物材料的保存生理活性物质易失活与降解，采集时必须保持材料的新鲜、防止腐败、变质与微生物污染。采摘必须新鲜、快速、及时速冻、低温保存速冻、冻干、有机溶剂脱水等组织块保存法细胞悬液保存法保存方法单层细胞保存法低温冷冻保存2、动物细胞的保存方法及影响保存质量的因素影响保存质量的因素：a、冻存速度：缓慢降温、加速融化b、保护剂：甘油/二甲亚砜c、冻结方法：收集细胞+保护剂+低温d、细胞复苏：融化+培养液渗透压法高压法减压法2、生物材料的预处理一、组织与细胞的破碎磨切法压力法震荡法冻融法物理法化学法组织自溶法酶解法噬菌体法生物法二、细胞器的别离为获得结合在细胞器上的一些生化成分或酶系，常常要先得到细胞器再进一步别离有效成分。方法：匀浆破碎细胞，离心别离〔差速/密度梯度〕3、生物活性物质的提取提取是利用制备目的物的溶解特性，将目的物与细胞的固形物成分或其它结合成分别离，使其由固相转入液相或从细胞生理状态转入特定溶液环境的过程。浸渍法：用冷溶剂溶出固体材料中的物质浸煮法：用热溶剂溶出目的物一、提取方法的选择目的物与杂质在溶解度与稳定性方面的差异选择适宜的溶剂系统与提取条件除去与目的产物性质差异较大的杂质、浓缩目的物本卷须知：酶类辅酶丧失和其他失活因素蛋白质类高级结构的破坏多肽及核酸类酶水解、抑制剂脂类氧化二、生物活性的保护措施采用缓冲系统：防止pH变化带来失活、提取效率下降磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液等添加保护剂：保护酶活性中心及某些活性基团复原剂、金属螯合剂、适量底物等抑制水解酶的作用：ETDA、热变性、pH值、抑制剂其他保护措施：根据目的物不同性质具体对待温度、紫外线、强酸碱、氧化剂等三、影响提取的因素1、温度提取温度↑溶解度↑温度↑物料的粘度↓，有利于分子扩散和机械搅拌对不耐热的生物活性物质的提取，一般在0~10℃有机溶剂提取一般在较低温度下进行2、酸碱度：抑制有害酶类的水解破坏作用，防止降解，提高收率中性：防止过酸或过碱及等电点，pH4~9酸性：偏酸性介质〔胰岛素等〕，破坏细胞碱性：碱性系统提取〔多糖类等〕3、盐浓度盐溶作用：盐离子作用于生物大分子表征，增加了表征电荷，使之极性增加，水合作用增强，促使其形成稳定的双电层，此现象为盐溶作用。与浓度和离子强度有关，高价酸盐作用＞单价酸盐四、常用的提取方法用酸、碱、盐水溶液提取离子型用表征活性剂提取非离子型在适当的pH和低离子强度条件下，与脂蛋白形成微泡，使膜渗透性改变或使之溶解提取方法固液提取相似相溶原理用有机溶剂提取液液提取双水相萃取法溶解度差异超临界流体萃取法分配系数与溶剂的用量Kmn{}Xn=X0Km+V残留量计算公式(1)分配系数↑，残留物质↑(2)溶剂↑，残留量↓(3)提取次数↑，残留量↓提取次数↑生产设备负担↑能耗↑周期↑劳动生产率↓产品失活生产上一般提取2~3次，溶剂为2~5倍材料4、生物活性物质的浓缩与