4#生物素-亲和素反应体系.docxVIP

生物素（Biotin）又被称为维生素H、维生素B7，是一种水溶性维生素，分子量约为244，广泛存在于动物肝、肾、酵母、牛乳中。生物素分子有两个环状结构，其中Ⅰ环为咪唑酮环，是与亲和素结合的主要部位；Ⅱ环为噻吩环，C2上有一戊酸侧链，其末端羧基是结合抗体和其他生物大分子的唯一结构，经化学修饰后，生物素可成为带有多种活性基团的衍生物——活化生物素。

亲和素是一种糖蛋白，主要包括卵白亲和素、链亲和素、中性亲和素等。

亲和素（Avidin）又称卵白素或抗生物素，分子量约为67KDa，等电点为10～10.5；在pH9～13缓冲液中性质均稳定，耐热并耐多种蛋白水解酶的作用。天然亲和素为碱性蛋白，由4个相同亚单位构成四聚体；每个亲和素亚单位通过其结构中的色氨酸残基与生物素中的咪唑酮环（I环）结合。因此，1个亲和素分子存在4个与生物素分子结合位点，其结合常数（Ka）高达1015mol/L（比抗原-抗体亲和力高103~106倍）。

中性亲和素（NuetralAvidin，NA）是一种去糖基化的亲和素，因此对外源凝集素的结合降低至检测不出的水平，分子量约为60KDa，等电点为6.5，这样也可以避免非特异性的结合，因此中性亲和素在常见三种亲和素中非特异性结合的水平是最低的。

链霉亲和素（Streptavidin，SA）是从链霉菌培养物中提取的一种分泌性蛋白质，分子量约为65kDa，等电点6.0。链