铜绿假单胞菌对肺血管内皮细胞功能的影响及其机制.docxVIP

中国医学科学院学报

ACTAACADEMIAEMEDICINAEsINICAE

vol.46No.11

.论著.

铜绿假单胞菌对肺血管内皮细胞功能的影响及其机制

张雷123王俊铁123何翔2吴敏34李国平12黄锦伟1

1澳门科技大学中药质量研究国家重点实验室%澳门999078

2成都市第三人民医院呼吸健康研究所过敏与精准医学实验室%成都610000

3北达科他大学医学与健康科学院生物医学科学系%美国北达科他州大福克斯58203

4中国科学院大学温州研究院%浙江温州325000

通信作者!黄锦伟电话!853-%电子邮件!kawwong@must.edu.mo

摘要:目的探究铜绿假单胞菌PA$感染对肺血管内皮细胞功能的影响%并探讨其加重小鼠肺部炎症反应的可能机制方法PAO1菌株感染人肺微血管内皮细胞HULEC-5a2h后%采用逆转录实时荧光定量PCRRT-qPCR$检测自嗤相关基因5ATG5$#6-磷酸果糖-2-激醇/果糖-2%6-二磷酸醇3PFKFB3$和钙貓蛋白5CDH5$的mRNA表达%免疫荧光检测ATG5#PFKFB3和血管内皮钙貓蛋白VE-cadherin$的蛋白表达采用小干扰RNAsiRNA$分别敲减ATG5#PFKFB3后%RT-qPCR检测ATG5#PFKFB3和CDH5的mRNA表达%免疫荧光检测PFKFB3和VE-cadherin的蛋白表达%并采用乳酸测定试剂盒检测细胞内乳酸的水平采用PAO1菌株感染小鼠后%肺组织切片病理染色观察小鼠肺部炎症%激光共聚焦显微镜观察并分析荧光标记的内皮细胞PFKFB3和VE-cadherin的表达量结果与对照组比较%PAO1感染HULEC-5a细胞后%PFKFB3mRNA和蛋白表达均增加P均0.05$%CDH5mRNA表达减少P=0.023$%VE-cadherin蛋白表达减少P0.001$%且连续性被破坏%乳酸含量升高P=0.017$与PAO1感染HULEC-5a细胞比较%PAO1感染敲减PFKFB3的HULEC-5a细胞后%CDH5mRNA表达增加P=0.043$%VE-cadherin荧光连续性得到恢复%乳酸含量降低P=0.047$PAO1感染敲减ATG5的HULEC-5a细胞后%PFKFB3mRNAP=0.013$和蛋白表达P=0.003$均增加%CDH5mRNAP=0.020$和VE-cadherin蛋白表达P=0.001$均减少%乳酸含量升高P=0.015$PAO1感染小鼠后%病理HE染色结果显示%肺泡内明显的红细胞渗漏%炎症细胞浸润%肺泡间隔增宽和部分血管内皮细胞脱落免疫荧光染色结果显示%与正常小鼠比较%PAO1感染小鼠内皮细胞PFKFB3表达增加%VE-cadherin荧光减弱%且不连续结论PA可能通过AGT5调控PFKFB3通路%破坏肺血管内皮细胞功能%进而加重小鼠肺部炎症反应

关键词:铜绿假单胞菌肺血管内皮细胞6-磷酸果糖-2-激醇/果糖-2%6-二磷酸醇3自嗤相关基因5感染

中图分类号:R378.99+1R563.1+9文献标识码:A文章编号:1000-503X2024$01-0001-10

DOI:10.3881/j.issn.1000-503X.15831

pseudomonasAeruginosaAffectstheFunctionofpulmonaryvascularEndothelialcells

ZHANGLei1%2%3%wANGJunyi1%2%3%HEXiang2%wUMin3%4%LIGuoping1%2%VincentKamwaiwong1

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