2025版高考生物一轮总复习选择性必修3第10单元生物技术与工程第7讲基因工程的基本操作程序和应用及蛋白质工程课件.pptxVIP

第7讲基因工程的基本操作程序和应用及蛋白质工程;考情研读·备考定位;考点一基因工程的基本操作程序;必备知识·夯实基础;(3)目的基因的获取

①人工合成____________。

②常用_________特异性地快速扩增目的基因。;2．基因表达载体的构建——基因工程的核心

(1)目的：使目的基因________________________________________

________，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。

(2)基因表达载体的组成及作用;(3)构建过程;3．将目的基因导入受体细胞;生物种类;辨析

(1)转化：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持_______________的过程。此处“转化”与肺炎链球菌转化实验中的“转化”含义相同，实质都是____________。

(2)农杆菌转化法中的两次拼接和两次导入：第一次拼接是将目的基因拼接到Ti质粒的_______________上，第二次拼接(非人工操作)是指插入目的基因的T－DNA拼接到受体细胞的_____________上；第一次导入是将含目的基因的Ti质粒导入_________，第二次导入(非人工操作)是指含目的基因的T－DNA导入____________。;(3)农杆菌特点

①能在自然条件下侵染_______________和____________，而对大多数_______________没有侵染能力。

②农杆菌细胞内含有____________，当它侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的T－DNA转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上。;4．目的基因的检测与鉴定;思|维|辨|析

易错整合，判断正误。

(1)引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸。()

(2)构建基因表达载体是基因工程的核心工作。()

(3)启动子是一段有特殊序列结构的DNA片段，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动DNA的复制过程。()

(4)将生物的所有DNA通过注射或花粉管通道法转入植物细胞中，就可获得具有理想性状的转基因植物。();(5)转化是指目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。()

(6)Ti质粒上的T－DNA可携带目的基因进入受体细胞，并可将目的基因整合到该细胞的染色体DNA中。();延|伸|探|究

1．利用PCR扩增目的基因时，为什么要用2种不同的引物？

提示：DNA是两条反向平行的双链结构，而复制时只能从固定的方向(模板链的3′端)开始，所以引物的碱基序列是不同的。

2．为什么切割含有目的基因的DNA片段和载体要选用同一种限制酶？是否只能用同一种限制酶？

提示：选用同一种限制酶切割会产生相同的末端，可以在DNA连接酶的作用下将切割的目的基因和载体连接起来。也可以使用能产生相同末端的限制酶切割。;3．在用土壤农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞的过程中，为什么一定要将目的基因插入到Ti质粒的T－DNA上？

提示：Ti质粒上的T－DNA也称为可转移的DNA，可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体DNA上。;剖析难点·考点突破;归纳总结：(1)在PCR过程中实际加入的为dNTP(即dATP、dGTP、dTTP、dCTP)，既可作为合成DNA子链的原料，又可为DNA的合成提供能量。

(2)引物既可以是DNA单链，也可以为RNA单链。细胞内的DNA进行复制时，也需要引物，一般为RNA片段。

(3)真核细胞和细菌的DNA聚合酶都需要Mg2＋激活。因此，PCR反应缓冲溶液中一般要添加Mg2＋。

(4)PCR扩增过程中的循环图示与规律;循环次数;2.如何筛选出含有目的基因的受体细胞;(1)原理：将目的基因插入含有两种抗生素抗性基因的载体时，如果目的基因插入某种抗生素抗性基因内部，则会导致该抗生素抗性基因失活。如图，目的基因插入了四环素抗性基因内部，则四环素抗性基因失活。

(2)被转化的大肠杆菌有三种：含环状目的基因的大肠杆菌、含重组质粒的大肠杆菌、含质粒的大肠杆菌。;(3)筛选方法：将大肠杆菌先放在含氨苄青霉素的培养基上培养，能生长的是含重组质粒的大肠杆菌和含质粒的大肠杆菌，如图1、2、3、4、5菌落，再利用灭菌的绒布影印到含有四环素的培养基上，如图能生长的菌落为2、3、4，则在含四环素培养基上不生长的即为含有目的基因的菌落，如图1、5菌落。最后，可在含氨苄青霉素的培养基上挑取1、5菌落进行培养。;3．启动子、终止子、起始密码子、终止密码子对比;考向一结合PCR技术的操作和应用，考查科学思维能力

(2024·天津模拟)PCR技术是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，使目的DNA得以迅速扩增。其简要过程如图所示。下列关于PCR技术叙述错误的是(