化妆品安全技术规范微生物检测.pptxVIP

;;1检测要求;化妆品注册或备案检验，应当依据化妆品安全技术规范，结合产品类别和类型，进行相应的检验工作

——《化妆品注册和备案检验工作规范》2019年第72号

;;;2.1化妆品采样要求;2.1.1液体样品

水溶性的液体样品：用灭菌吸管吸取10mL样品加到90mL灭菌生理盐水中，混匀后，制成供试液。;疏水性样品：称取10g，置于灭菌的研钵中，加10mL灭菌液体石蜡，研磨成粘稠状，再加入10mL灭菌吐温80,研磨待溶解后，加70mL灭菌生理盐水，在40°C~44C水浴中充分混合，制成供试液。;2.1.3固体样品

称取10g，加到90mL灭菌生理盐水中，充分振荡混匀，使其分散混悬，静置后，取清液作为供试液。;2.1.4化妆品样品前处理注意事项;粉类产品;2.2菌落总数检验方法;卵磷脂吐温80营养琼脂;为便于区别化妆品中的颗粒与菌落，需在每100mL卵磷脂吐温80营养琼脂中加入1mL0.5%的TTC溶液，如有细菌存在，培养后菌落呈红色，而化妆品的颗粒颜色无变化。

同时，需有生理盐水及培养基的空白对照，以确保二者灭菌完全，否则会影响结果的准确性;2.2.1计数及报告结果;3、若所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见下图例4）

4、若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见下图例5）

5、若所有稀释度的平均菌落数均不在30-300之间，其中一个稀释度大于300,而相邻的另一稀释度小于30时，则以接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见下图例6）。;2.3霉菌和酵母菌检验方法;孟加拉红培养基;2.3.1计数及报告结果;2.4耐热大肠菌群检验方法;阴性;如产酸产气，划线接种到伊红美蓝琼脂平板上，置36°C±1°C培养18h~24h。经培养后，在上述平板上观察有无典型菌落生长。耐热大肠菌群在伊红美蓝琼脂培养基上的典型菌落呈深紫黑色，圆形，边缘整齐，表面光滑湿润，常具有金属光泽。也有的呈紫黑色，不带或略带金属光泽，或粉紫色，中心较深的菌落，亦常为耐热大肠菌群，应注意挑选。;2.4耐热大肠菌群检验方法;2.5铜绿假单胞菌检验方法;第二种阳性结果报告方式;分离培养：从培养液的薄膜处挑取培养物，划??接种在十六烷三甲基溴化铵琼脂平板上，置36°C±1°C培养18h-24h。

铜绿假单胞菌特征：其菌落扁平无定型，向周边扩散或略有蔓延，表面湿润，菌落呈灰白色，菌落周围培养基常扩散有水溶性色素。;2.5铜绿假单胞菌检验方法;2.5.1铜绿绿脓菌素实验注意要点;2.5铜绿假单胞菌检验方法;2.6金黄色葡萄球菌检验方法;分离：自SCDLP增菌培养液中，取1-2接种环，划线接种在BairdParker平板培养基，如无此培养基也可划线接种到血琼脂平板，置36°C±1°C培养48h。在血琼脂平板上菌落呈金黄色，圆形，不透明，表面光滑，周围有溶血圈。

;Baird-Parker平板：圆形，光滑，凸起，湿润，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混浊带,在其外层有一透明带。用接种针接触菌落似有奶油树胶的软度。;2.6金黄色葡萄球菌检验方法;延时符