有机物的分离与纯化方法.ppt

六）薄层色谱分离提纯比柱色谱更加应用广泛的分离分析手段。用于分离提纯具有简单快速的特点。分离容量不及柱色谱大，效果也不及柱色谱好。薄层分类：吸附与分配色谱，分配色谱又分正相色谱与反相色谱。正相：含水吸附剂（固定相），弱极性流动相，极性小的移动快。反相：钝化吸附剂（固定相），强极性流动相，极性强的移动快。第31页,共53页，2024年2月25日，星期天薄层吸附色谱1、固定相：硅胶、氧化铝活化。a加石膏为G型，不加为H型，加荧光剂为GF或HFb正相分配色谱：纤维素或用缓冲水溶液处理过的硅胶、或用极性有机溶剂处理过的硅胶。C、反相分配色谱固定相：用硅酮、石蜡等非极性溶剂处理过的硅胶或纤维素。D、薄层涂层：薄层自然晾干后进行活化。E、活化温度与时间：硅胶板105-120℃，1h；氧化铝板：70℃，40min。第32页,共53页，2024年2月25日，星期天2、吸附剂选择吸附剂用途吸附剂用途硅胶吸附，分配氧化铝吸附，分配硅藻土分配纤维素分配氢氧化钙吸附聚酰胺吸附离子交换树脂离子交换氧化镁吸附，分配吸附剂粒度的要求：5-50μm。粒度太大推进快，影响分离；粒度太小则展开慢，出现拖尾或横向扩散过度。第33页,共53页，2024年2月25日，星期天3、制备薄层板的参数薄层板规格20×20cm，20×15cm，10×20cm，10×15cm，7.5×20cm，7.5×15cm，5×20cm，5×15cm。制板：皂液洗净，烘干备用。浆液与活化硅胶G:水=1:2（W∶W），110-130℃，1h氧化铝G:水=1:1～1:3（W∶W），80-100℃/30min硅藻土G:水=1:2（W∶W），110℃，30min纤维素粉:95%乙醇（丙酮）=1:5～1:6（W∶W），100℃，3-5min聚酰胺:甲醇=1:4～1:6（W∶W），60-70℃，1h。第34页,共53页，2024年2月25日，星期天4、薄层板的制备制浆：按照比例将吸附剂和相应的液体加入烧杯，搅拌均匀。铺板：一般将均匀浆液适量倒在薄板上，两手指夹薄板两侧，旋转倾斜，让浆液在薄板上流均匀，也可以适度敲击震荡，使浆液流平。或者将两板贴紧，插入浆液中，在提起，让多余浆液流下，一次可以制备两块板。还有用涂布器铺板的。薄板铺好后置平台自然晾干，活化备用。第35页,共53页，2024年2月25日，星期天5、展开剂选择与淋洗剂标准一致。官能团极性如下：RH＜RCl＜—CH=CH2＜ROCH3＜RNO2＜RNMe2＜RCOCH3＜RCO2R＜R2C=O＜RCHO＜RSH＜RNH2＜RNHCOR＜ROH＜RCONH2＜RCO2H一般单一展开剂没有很适合的极性，多用相容的展开剂混合，以调节展开剂极性。第36页,共53页，2024年2月25日，星期天6、被分离物质、淋洗（展开剂）及固定相的极性选择关系圆弧内三角形可以绕圆心转动，其三个角顶点分别指向三类物质的极性区限。采用混合溶剂调节极性。弧线A代表吸附剂的活性，弧线B代表展开剂的极性，弧线C代表被分离物质极性，都顺箭头方向增大。三角形的三个角所指位置是三者的关系。第37页,共53页，2024年2月25日，星期天7、一般薄层色谱实验操作点样—展开—显色—计算Rf值点样：在距薄板下沿1cm处的水平线上，毛细管口液滴与薄层表面相切，切忌玻璃管戳破薄层，可以重复点样。展开：薄层板下沿水平插入层析缸，展开剂不能淹没样点，缸内充满展开剂蒸汽，要盖上盖子，展开剂水平线上升，接近薄层上沿时为止。显色：大多物质要进行物理或者化学方法显色。薄层板从层析缸取出，在展开剂前沿作一记号，待展开剂挥发干后显色。物理方法：紫外灯照射；碘蒸汽熏蒸等。化学方法：可以产生有色物质的反应。第38页,共53页，2024年2月25日，星期天几种点样方法直接点样离下沿1.5-2.0cm处毛细管分次点样≤0.3cm。间接点样打孔器打滤纸片2-3mm直径，试液点满纸片，晾干；打孔器打薄层2-3mm的孔，纸片嵌入。试样液用打孔器打下的吸附剂吸收，干后填入孔中；薄层上挖一条水平沟槽，试样液用吸附剂吸收，干后填入沟槽（展开后是平行带状）第39页,共53页，2024年2月25日，星期天8、等温吸附线与分离效果的关系恒温下以展开相浓度为横坐标，吸附相浓度为纵坐标作图，得到等温吸附曲线。曲线中，A物质斜率大，被吸附作用强，展开速度慢，Rf值小。Ⅰ是理想状况，显色后是标准圆斑；Ⅱ和Ⅲ出现“拖尾”