【知识解析】血细胞计数板的使用.ppt

讲解1血细胞计数板的结构血细胞计数板的使用血细胞计数板（如图1所示）由一块厚的玻璃片特制而成。一块血细胞计数板有两个计数室，每个计数室（大方格）的面积为1mm2，加盖玻片后，计数室与盖玻片的距离是0.1mm，即计数室深度为0.1mm，所以每个大方格的容积为0.1mm3。计数室通常有两种规格（如图2所示）：一种是将一个计数室（大方格）分为25个中格，每个中格又分为16个小格；另一种是将一个计数室（大方格）分为16个中格，每个中格又分为25个小格。不管何种规格的计数室，都包含400个小格。讲解1血细胞计数板的结构血细胞计数板的使用图1血细胞计数板的结构讲解1血细胞计数板的结构血细胞计数板的使用图2两种规格血细胞计数板的计数室讲解2利用血细胞计数板计数的具体操作步骤血细胞计数板的使用（1）取血细胞计数板，并将盖玻片放在其计数室上方。（2）将培养液轻轻振荡几次，使微生物分布均匀后，用吸管吸取少量培养液滴在盖玻片边缘，让培养液自行渗入计数室。多余的培养液用滤纸吸去。（3）静置片刻，待微生物全部沉降至计数室底部，再利用显微镜观察并计数。讲解3计数规则（以计数酵母菌为例）血细胞计数板的使用（1）如图2所示，25中格×16小格的计数板，需要对四个顶角及中央5个中格中的酵母菌进行计数；16中格×25小格的计数板，则只需对四个顶角中格中的酵母菌进行计数。随后估算出每个小方格中的酵母菌数。（2）对于压在中方格边线上的酵母菌，只计数相邻两边（记上不记下、记左不记右）及其夹角上的个体。讲解3计数规则（以计数酵母菌为例）血细胞计数板的使用（3）若一个小方格中酵母菌数量过多，可先对样品进行适当稀释后，再重新制片，观察计数。（4）出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半时，即可作为两个菌体计算。（5）每个样品应计数三次，取平均值。讲解4计算公式（以计数酵母菌为例）血细胞计数板的使用1mL培养液中酵母菌总数小方格中酵母菌平均数×4000.1mm3（大方格）中菌体数1mm3中菌体数1mL中菌体数（稀释后）＝×10×1000×稀释倍数例题①培养酵母菌时，必须去除培养液中的溶解氧。②将适量干酵母放入装有一定浓度葡萄糖培养液的锥形瓶中，在适宜条件下培养。③培养早期不需取样，培养后期每天同一时间取样一次进行计数。某研究性学习小组为探究培养液中酵母菌种群数量的变化，进行如下相关操作：血细胞计数板的使用例题④取样前，将培养液振荡摇匀后，用吸管从锥形瓶中吸取一定量的培养液。⑤在血细胞计数板中央滴一滴培养液，盖上盖玻片，并用滤纸吸去边缘多余培养液。血细胞计数板的使用⑥待酵母菌全部沉降到计数室底部，将计数板放在载物台中央，在显微镜下观察、计数。⑦计数时，压在中方格界线上的酵母菌应计数相邻两边及其夹角上的菌体。例题请回答以下问题：（1）该兴趣小组的操作过程有几处错误，请指出并更正。（2）有同学质疑该兴趣小组没有设置对照组。这种质疑是否正确，为什么？血细胞计数板的使用例题请回答以下问题：（3）若使用的血细胞计数板（规格为1mm×1mm×0.1mm）每个计数室分为25个中方格，每个中方格又分为16个小方格，将样液稀释100倍后计数，发现计数室四个角及中央共5个中方格内的酵母菌总数为20个，则培养液中酵母菌的密度为________个/mL。血细胞计数板的使用解析（1）酵母菌是兼性厌氧菌，无需去除培养液中的溶解氧，①错误；干酵母置于葡萄糖培养液中可活化，②正确；实验自开始后应连续7天同一时间对培养液进行抽样检测和计数，以研究酵母菌种群数量的变化规律，③错误；摇匀后取样可减少实验误差，④正确：血细胞计数板在使用过程中应先盖盖玻片，再在盖玻片边缘滴入培养液，让培养液自行渗入计数室，⑤错误：酵母菌沉降到计数室底部后计数可使计数更准确，⑥正确：压线菌体应计数相邻两边及其夹角上的个体，⑦正确。血细胞计数板的使用解析（2）该实验不需要额外设置对照组，不同天数的取样与计数结果可以形成相互对照。（3）利用公式1mL培养液中酵母菌总数＝小方格中酵母菌平均数×400×10×1000×稀释倍数＝20/80×400×10×1000×100＝1×108（个）。血细胞计数板的使用答案（1）①无需去除溶解氧，③培养时每天都需要进行取样计数，⑤利用血细胞计数板计数应先盖盖玻片，再在盖玻片边缘滴入培养液，让培养液自行渗入计数室。（2）不正确，该实验中每天同一时间取样的计数值可以形成相互对照，不需要额外设置对照组。（3）1×108血细胞计数板的使用再见****