第九章 DNA复制课件.ppt

第九章DNA的生物合成(复制)

DNABiosynthesis，Replication;本章内容;中心法则;第一节复制的基本规律;复制的化学反应;第九章DNA复制;第九章DNA复制;一、半保留复制

(semiconservativereplication)

二、双向复制

(bidirectionalreplication)

三、半不连续复制

(semi-discontinuousreplication);一、半保留复制(semiconservativereplication);(二)实验依据：密度梯度实验

（MeselsonandStahl）;密度梯度实验;（三）生物学意义：

1.保证遗传信息传递的忠实性

2.遗传和变异的统一;第九章DNA复制;复制时，DNA从起始点(origin)向两个方向解链，形成两个延伸方向相反的复制叉，称为双向复制。;A.环状双链DNA及复制起始点

B.复制中的两个复制叉

C.复制接近终止点(termination,ter);5’;原核生物：只有一个复制子

真核生物：多个复制子，多个起点，形成多个

“复制眼”或“复制泡”;第九章DNA复制;复制起始点、复制子与复制叉（动画演示）;三、半不连续复制

(semi-discontinuousreplication);3?;3?;DNA复制的酶学

TheEnzymologyofDNAReplication;参与DNA复制的物质;一、解螺旋酶(helicase)

——利用ATP供能，作用于氢键，使DNA双链解开成为两条单链

二、单链DNA结合蛋白(singlestrandedDNAbindingprotein,SSB)

——复制中维持模板处于单链状态并保护单链完整;;拓扑异构酶作用特点

既能水解、又能连接磷酸二酯键;第九章DNA复制;四、DNA聚合酶;5′AGCTTCAGGATA?3′

|||||||||||;（一）原核生物的DNA聚合酶;功能：

5??3?聚合酶活性、5??3?和3??5?外切酶活性

复制中的错误校读，复制和修复中的空隙填补。;DNApolⅠ:

5‘→3’聚合活性和5‘→3’外切酶活性

缺刻平移

(nicktranslation);DNA-polⅡ（120kD）;功能：

原核生物复制延长中真正起催化作用的酶;αεθ为核心酶：

α：5′→3′聚合活性

ε(伊普西龙)：3′→5′外切酶活性

θ(西塔)：维系αε二聚体作用;原核生物的DNA聚合酶;（二）真核生物的DNA聚合酶;真核生物的DNA聚合酶;五、引物酶(primase)：

由EcolidnaG编码

特殊的RNA聚合酶

复制起始时催化生成RNA引物的酶

;DNA聚合酶有3??5?外切酶活性

也就说聚合酶在开始形成一个新的磷酸二酯键前，总先要检查前一个碱基是否正确，这就决定它不能从头开始合成。因此先合成一段低忠实性的多核苷酸来开始DNA的合成，并以核糖核苷酸来标记是“暂时”的，当DNA开始聚合以后再以5??3?核酸外切酶的功能切除，保证了复制的忠实性。;HO;1.断端的3?-OH末端，5?-P末端

2.连接的是双链中的单链缺口

3.需要ATP;⑴复制中起最后接合缺口作用。

⑵DNA修复、重组及剪接中起缝合缺口作用。

⑶基因工程的重要工具酶之一。;DNA生物合成过程

TheProcessofDNAReplication;一、原核生物的DNA生物合成;（一）复制的起始：;E.coli复制起始点oriC;反向重复序列：由两个相同顺序的互补拷贝在同一DNA链上反向排列而成。这种重复顺序复性速度极快。;复制叉的形成----DNA双链解开分成两股，各自作为模板进行复制，形成在显微镜下可看到的叉状结构。;;;在DNApolШ的催化下，以四种dNTP为底物，在RNA引物的3′端以磷酸二酯键连接上脱氧核苷酸并释放出焦磷酸。DNA链的延伸同时进行领头链和后随链的合成。;1、前导链的延长：

DNApolⅢ全酶二聚体的一个亚基与前导