(2.3)--[5]chapter5酶工程酶工程酶工程.pptVIP

（五）置换修饰（1）金属离子置换修饰：把酶分子中的金属离子换成另一种金属离子，使酶的特性和功能发生改变的修饰方法称为金属离子置换修饰。α-淀粉酶中的钙离子1、金属离子置换修饰是将（）中的金属离子用另一种金属离子置换A、酶液B、反应介质C、反应体系D、酶分子*ModificationofEnzymeMolecularModificationofEnzymeMolecularModificationofEnzymeMolecularModificationofEnzymeMolecularModificationofEnzymeMolecular**胃蛋白原的激活属于HCL催化的*SOD非活性部位赖氨酸中E-NH2的修饰*第五章酶分子的修饰ModificationofEnzymeMolecular*本章内容框架及学习要求*What?什么是酶分子修饰?Why?为何要对酶分子进行修饰？How?怎样对酶分子进行修饰？了解掌握熟悉汰渍奇强？还是雕牌奥妙？去污能力哪家强？*PK洗涤用品行业强调的“高效”实际上就提高酶的催化效率问题。酶的高效性是所有酶制剂应用的追求目标。知识回顾-酶的作用特点专一高效温和酶的催化作用一般都在常温、常压、pH近乎中性的条件下进行。洗涤用品中的碱性蛋白酶主要为枯草芽孢杆菌发酵生产，而它的最适催化温度为40~50℃。怎样使酶在实际应用时具有较高活性呢？酶如此“矫情”需要温柔以待牛仔裤磨洗加入纤维素酶，但是磨洗过程需强酸强碱，而酶不耐受这种pH环境的。*你知道有种病叫做：“菠萝病”吗？*菠萝中的致敏结构—菠萝蛋白酶具有抗原性，可刺激口腔粘膜引起过敏反应。酶具有抗原性会引发过敏反应等不良反应一、酶分子修饰的目的（1）酶分子修饰的目的之：*提高酶的催化效率增强酶的稳定性降低或消除抗原性锦上添花1965年Blake对溶菌酶的结晶进行了X-射线衍射分析，酶的活性中心的催化机理获得直接而具体的解释。*知识回顾：酶的分子结构溶菌酶单晶体底物活性中心以外的必需基团结合基团催化基团活性中心*酶分子修饰的目的之：揭开“庐山真面目”*研究酶的活性中心的必需基团；探讨酶的结构和催化特性之间的关系一、酶分子修饰的目的（2）酶分子修饰（enzymemodification）：通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变，从而改变酶的催化特性的技术过程称为酶分子修饰。即：在体外将酶分子通过人工的方法与一些化学基团（物质），特别是具有生物相容性的物质，进行共价连接，从而改变酶的结构和性质。二、酶分子的修饰的概念*（一）小分子结合修饰-----侧链基团修饰（二）大分子结合修饰（三）肽链有限水解修饰----主链修饰（四）核苷酸剪切修饰（五）置换修饰（1）金属离子置换修饰（2）氨基酸置换修饰（3）核苷酸置换修饰金属离子PEG三、酶分子修饰的方法*侧链基团修饰(小分子结合修饰)（sideresiduesmodification）采用一定的方法使酶的侧链基团发生改变，从而改变酶的催化特性的方法。（一）侧链基团修饰*对结合基团修饰可改变酶的动力学性质，改变酶对特殊底物的束缚能力。改变对底物亲和能力对催化基团可以通过选择性修饰侧链成分来实现。改变催化性质（一）侧链基团修饰利用侧链基团修饰可以研究酶的活性中心包括哪些功能基团。*某些功能基团，如Lys的氨基、Asp与Glu的羧基、Cys的巯基、His的咪唑基、Tyr和Ser的羟基是酶的必需基团酶的活性中心的重要化学基团7种氨基酸出现的频率最高LysAspGluCysHisTyrSer（兰天果拌猪肉丝）侧链基团修饰的应用*主要的修饰方式有：氨基修饰、羧基修饰、巯基修饰、酚基修饰、胍基修饰、咪唑基修饰、吲哚基修饰及分子内交联修饰等。（一）侧链基团修饰*利用水溶性大分子与酶结合，使酶的空间结构发生改变，从而改变酶的催化特性的方法称为大分子结合修饰。应用最为广泛的酶分子的修饰方法。（二）大分子结合修饰*蛋白酶抑制剂酸碱1、修饰剂的选择常用的水溶性大分子修饰剂有：右旋糖酐，PEG、肝素、蔗糖聚合物、聚氨基酸等。2、修饰剂的活化3、修饰修饰剂与分离纯化的酶液混合，在一定温度、pH条件下反应一段时间，使活化基团与酶分子的侧链基团共价结合。4、分离（1）大分子结合修饰的方法*运用哪