(3.7)--酶07-酶促反应动力学.pdf

Biochemistry

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第三章酶

酶促反应动力学

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教学目的

了解酶促反应速度的影响因素及其影响机制

掌握米氏方程的应用

酶促反应动力学的概念Biochemistry

酶促反应速率表示酶促反应的快慢程度，通常以单

位时间内底物浓度的减少或产物浓度的增加来表示。

反应速度取其初速度，即底物的消耗量很小（一般

在5﹪以内或10min内）时的反应速度。

酶促反应动力学是研究酶促反应速度及其影响因素

的科学。

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酶促反应的影响因素主要包括酶的

浓度、底物的浓度、pH、温度、抑制剂

和激活剂等。

一、底物浓度对反应速度的影响Biochemistry

1.米氏方程Biochemistry

Michaelis和Menten提出了酶促反应的动力学方程：

从米氏方程可知：Biochemistry

当底物浓度很低时，

[S]Km,则V≌Vmax[S]/Km，反应速度

与底物浓度呈正比;

当底物浓度很高时，

[S]Km，此时V≌Vmax，反应速度达最大

速度，底物浓度再增高也不影响反应速度。

[S]=Km，此时V≌Vmax/2，反应速度为最

大速度的一半，由此可以得出Km的物理意义。

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2.米氏常数的意义Biochemistry

（1）物理意义：Km值等于酶反应速度为最大速度

一半时的底物浓度。

（2）Km值愈大，酶与底物的亲和力愈小；Km值愈

小，酶与底物亲和力愈大。酶与底物亲和力大，

表示不需要很高的底物浓度，便可容易地达到最

大反应速度。

（3）Km值是酶的特征性常数，只与酶的性质，酶

所催化的底物和酶促反应条件有关，与酶的浓度无

关。

3.Km在实际中应用Biochemistry

（1）判断酶的最佳底物如果一种酶可作用于多个底物,

就有几个Km值，其中Km最小对应的底物就是酶的天然底

物。如蔗糖酶既可催化蔗糖水解(Km=28mmol/L),也可催

化棉子糖水解(Km=350mmol/L),两者相比，蔗糖为该酶的

天然底物。

（2）判断反应方向或趋势

催化正逆反应的酶，其正逆两向的反应的Km不同，

如果正逆反应的底物浓度相当，则反应趋向于Km对应

底物的反应方向。

（3）计算一定速度下的底物浓度

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（4）了解酶的底物在体内具有的浓度水平：

（5）鉴定酶：通过测定可以鉴别不同来源或相同来源

但在不同发育阶段、不同生理状态下催化相同反应的

酶是否属于同一种酶。

4.Km求法：Biochemistry

称为Lineweaver-Buck方程（或双倒数方程）