医学专题乙型肝炎标志物检测及质量控制.pptVIP

*定性、半定量与定量项目的质量控制定性试验：报告“阴性-”或者“阳性+”的试验。半定量试验：报告“x+”、“阴性-”或者“滴度”的试验。定量试验：报告定量检测项目的试验。质量控制*常见定性、半定量及定量试验的检测报告方式定性检测肉眼判读结果，无法（需）读取检测信号大小（强弱），直接报告阴阳性的。如：ENA抗体、金标法项目、免疫印迹法项目。仪器判读连续检测信号，使用Cut-off判断阴阳性的。如：ELISA、发光仪等。半定量检测肉眼或者仪器判读，判别颜色强弱并报告“x+”或报告稀释度的。如：尿干化学、凝集试验。定量检测*定性、半定量及定量项目的质控方法定性检测：直接报告阴阳性的注意“质控品”与“阴阳性对照”的区别。需要阴性和阳性质控各一。最好有弱阳性质控。无法统计质量控制，但须回顾性统计符合率。定性检测：以Cut-off值报告阴阳性结果的。用阴性质控、弱阳性质控（如不可取得，只用阳性质控）来控制。夹心法弱阳性质控的S/CO约为1.5-4，视不同方法而定，如竞争法：S/CO约为0.5-0.9。用“符合度”判断质控情况。用L-J图控制精密度：定性sAg、sAb、eAgCV%15%左右。eAb、cAbCV%20%定量sAg、sAb10%*定性、半定量及定量项目的质控方法半定量检测：报告“x+”或稀释度的选择阴性和适中浓度质控品。如2+。1+~3+为在控。无法统计质量控制，但须回顾性统计各结果比率。定量检测使用定量质控方法*定性项目质控还因注意的几个问题质控判断和精密度控制分开。推荐用S/CO值建立均值、SD、CV%。因为有些读数值很低的项目是不符合相应统计要求的。如过低值的CV%会很大。加心法使用弱阳性和阳性统计。竞争法用阴性和弱阳性统计。避开极低的S/CO。最好附加极高值质控排除钩状效应。*乙肝标志物质量控制主要包括三个方面：（1）测定前的质量控制；（2）统计学质量控制；（3）质量控制的评价。*HBsAg测定中可能存在的挑战：假阴性HBsAg含量低于所用方法的测定下限之下。如感染的“窗口期”、急性期后或恢复期、自限性感染末期的携带者等编码HBsAg的HBV-S基因的突变HCV/HDV重叠感染对HBV复制和/或HBsAg的表达的抑制作用测定方法所用抗体对HBV不同基因型检测敏感性的不同钩状效应（HOOKEFFECT）*HBsAg的变异所致的不常见的HBV

标志物模式或不一致的结果单独抗HBc阳性。HBsAg阴性但HBeAg阳性。HBsAg（HBeAg）和抗HBs（大多为100IU/ml的低滴度）同时存在。使用不同厂家的HBsAg试剂盒得到的不一致结果。*抗-HBs是HBsAg刺激机体产生的特异性抗体，是一种保护性抗体，能中和HBV，初感染2-6月出现。抗-HBs阳性见于HBV既往感染者，乙肝恢复期及乙肝疫苗免疫后。乙肝病毒表面抗体（HBsAb）*乙肝病毒表面抗体（HBsAb）抗-HBs定量测定：（1）抗-HBs含量在0-10mIU/ml，表示不具有保护性，需要注射乙肝疫苗（3针：0-1-6方案）。（2）抗-HBs含量在10-100mIU/ml，表示具有保护性，但较弱，需要乙肝疫苗强化注射（1针）。（3）抗-HBs含量大于100mIU/ml，表示具有很强的保护性，不需要注射乙肝疫苗。*乙肝病毒表面抗体（HBsAb）接受乙肝疫苗接种者，体内血循环中除了抗HBs外，不应出现其它乙肝病毒感染血清免疫学标志物，如抗HBe、抗HBc等，一旦出现除抗HBs以外的标志物，则应视为既往HBV感染。血清中抗HBs和HBsAg同时检出，可能为抗HBs产生的早期，或属于不同亚型的HBV感染，或由HBV的S基因变异所致。自然发生的逃逸变异株可使某些慢性携带者同时存在HBsAg和抗HBs，产生的抗体直接针对血循环中HBsAg抗原不含的表位，因而不具保护作用。*乙肝病毒核心抗原（HBcAg）和核心抗体（抗HBc）机体对HBV抗原的免疫应答最早出现的是对HBcAg的细胞免疫应答，随后是体液免疫应答产生抗HBc，总抗HBc包括抗HBc-IgM和HBc-IgG等。抗HBc不是保护性抗体。抗HBc在血中呈低滴度且与抗HBs同时存在，是既往感染的标志。在HBV高流行人群中，抗HBc常作为疫苗免疫前的筛检方法。在欧洲和美国，抗HBc还是血液筛查的一个指标。在我国，抗HBc没有作为血液筛查指标，其主要原因可能是抗HBc检测的假阳性导致血液废弃过多。*乙肝病毒核心抗原（HBcAg）和核心抗体（抗HBc