冰冻红细胞去甘油技术研究新进展.docx

冰冻红细胞去甘油技术争论进展

袁君;唐雯;栾建凤

【期刊名称】《《临床输血与检验》》

【年(卷),期】2023(021)005

【总页数】3页(P558-560)

【关键词】冰冻红细胞;甘油去除技术

【作者】袁君;唐雯;栾建凤

【作者单位】210002东部战区总医院输血科

【正文语种】中文

【中图分类】R457.1

为了避开低温对红细胞造成的溶液损伤、脱水损伤及胞内外的冰晶损伤，冰冻红细胞制备过程中需要参加低温保护剂。但是，多数的低温保护剂都具有不同程度的毒性，直接输入人体内会造成巨大的损害[1，2]。因此，我们在输注冰冻红细胞前需要对其低温保护剂甘油进展去除[3]。早期，甘油去除方法经受了沉降法、一步离心法、多步稀释离心法、透析法、透析超滤法的进展，但是由于这些方法给红细胞带来的渗透性损伤、机械性损伤以及洗脱时间长、去甘油后的红细胞不符合国家标准等缺点，一种连续去除甘油的微流膜装置于2023年被RatihE.提出，除了能够降低红细胞的损伤程度以外，还大大缩短了甘油的洗脱时间，约3分钟完成，但是这个装置目前还没有临床应用的报道[4]。

沉降法

原理在pH为5.2～6.1的环境中，红细胞膜的脂蛋白能够与血浆中的γ球蛋白形成可逆复合物。冰冻红细胞液的pH为7，参加非电解质后，离子强度降低使得离子间引力变小，红细胞与球蛋白结合沉降；参加电解质后，pH上升，离子强度上升引力变大，红细胞与球蛋白解离后成为悬浮红细胞[5]。

方法利用上述原理，1963年，Huggins首先使用沉降法去除冰冻红细胞中的甘油并应用于临床。他先在冰冻红细胞中参加高渗的 50%的葡萄糖溶液进展洗涤，再用10%的蔗糖溶液洗涤，完成上述步骤后用生理盐水洗涤一次将红细胞悬浮在

生理盐水中。之后，日本的偶田幸男[6]也利用高浓度葡萄糖和大分子物质右旋糖酐等作为沉降剂来获得悬浮红细胞，该法红细胞回收率为〔89.25±4.17〕%。我国在1987年也将羧甲基淀粉钠用来分别循环血白细胞血小板[7]。

优缺点沉降法操作简便，不需要昂贵的设备，且通过韩颖[6]等人的试验证明，用此方法得到的去甘油冰冻红细胞经检测符合质量要求，但由于沉降剂具有较大的分子量，抗原性强易引发过敏反响，所以临床应用受到了限制。

离心法

原理目前最常用的去除冰冻红细胞中甘油的方法是离心法，该方法是将等渗盐溶液或者渗透压梯度的高渗盐水参加到冰冻红细胞中，利用细胞膜两侧的渗透压不同，将红细胞中的甘油置换出来，离心后去除含有甘油的上清即得到去甘油的冰冻红细胞[8]。

方法

一步离心法利用等渗盐溶液〔0.9%NaCl〕稀释冰冻红细胞中的甘油溶液，离心后去除上清得到红细胞。

多步离心法为了削减去除甘油过程中细胞的损伤，尤其是渗透性损伤，争论人员在一步离心法的根底上建立了多步稀释离心法[9]。多步法将一步法中的等渗

盐水改进为梯度渗透压的生理盐水NaCl〔9%，2%，0.9%〕，对冰冻红细胞进展

洗涤，红细胞最终悬浮于等渗的盐溶液中[10]。此后，盐溶液的浓度、用量等问题都被进一步的争论所确定，以期最大程度的降低渗透性损伤，提高红细胞回收率。2023年于来水[11]等人在冰冻红细胞解冻第一次洗涤液和其次次洗涤液中分别参加1.2%、0.2%的非电解质木糖醇，降低了红细胞血袋内离子间的吸引力，与脂蛋白结合的球蛋白之间又可以相互结合起来，使红细胞聚拢，以削减洗涤过程对红细胞膜的冲击力，从而降低红细胞溶血的发生，且不影响去甘油红细胞的质量，其红细胞回收率为〔84.3±1.6〕%，甘油残留量〔0.36±0.04〕g/L。2023年张成松[12]同样利用糖类的这一性质，在去甘油化过程中的第1次洗涤液和第2次洗涤液均改用10%的蔗糖溶液，同样提高了红细胞的回收率，其回收率为

〔83.99±1.58〕%，甘油残留量〔0.36±0.03〕g/L。另外，随着时间的推动，越来越多的争论人员开头设计自动化洗涤方式以实现甘油的连续清洗，与手工法相比大大缩短了洗涤时间，并保证血液在密闭环境中不受污染。2023年徐树良[13]建立了扩容降渗法，将扩容液加到冰冻红细胞中，红细胞随着扩容液的参加，其四周的渗透压缓慢的、平稳的降至等渗状态，最终利用血浆单采机收集，其红细胞回收率为〔85.6±2.1〕%，甘油残留量〔1.39±0.28〕g/L。越来越多的进口洗涤仪消灭在国内市场，比方美国血液技术公司的全自动血细胞洗涤仪HaemonticsACP115、ACP215[14，15]，细胞回收率为〔86.17±4.12%〕，甘油残留量

〔0.31±0.223〕g/L，耗时仅需50～60min，美国GambroBCT公司的COBE2991以及BB