淮海工学院生物化学大实验报告niujun.docVIP

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淮海工学院生物化学大实验报告niujun

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海洋学院

综合大实验报告

专业:生物技术班级生技121班

姓名:newjhon学号:21

题目:生物化学大实验

指导教师:孙玉英

2014-2015学年第1学期

2014年12月22日--2015年1月2日

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3结果与分析

3.1实验结果

3.1.1酶的特异性

实验现象:①号试管经沸水浴后,试管内颜色仍为蓝色,但在试管底部可以看出有些许砖红色沉淀出现;②号试管经沸水浴后颜色没有发生变化(仍为浅

蓝色。(如图1)

②号试管

②号试管 ①号试管

图1酶的特异性

实验现象表明:唾液淀粉酶能水解淀粉,而不能水解蔗糖。说明唾液淀粉酶具有特异性。

3.1.2温度对酶活性的影响

实验现象:①号试管加5滴碘液并混匀后颜色趋近与碘液原来的颜色,但较②号试管颜色较深;②号试管加5滴碘液并混匀后也趋近碘液本身颜色,但比碘液颜色浅;③号试管加5滴碘液并混匀后变成深蓝紫色。(如图2)。

②③

图2温度对酶活性的影响

实验现象表明:经过冰水浴后,唾液淀粉酶活性降低,但仍能将淀粉分解成葡萄糖;而在37℃

3.1.3pH对酶活性的影响

实验现象:①号试管逐滴加入3滴碘液并混匀后变成酒红色;②号试管逐滴加入3滴碘液并混匀后接近碘液本身的颜色;③号试管逐滴加入3滴碘液并混匀后变成浅蓝黄色。(如图3)。

② ③

② ③

图3pH对酶活性的影响

实验现象表明:pH为1.5(强酸性)条件下,唾液淀粉酶可以水解淀粉;pH为6.8(接近中性)条件下,唾液淀粉酶活性较高,能水解淀粉;pH为9.8(碱性)条件下,唾液淀粉酶仍能水解淀粉,只是较pH1.5和pH9.8相比,酶的活性较弱。

3.2结果分析

本实验研究酶的特异性及温度、pH对酶活性的影响得到以下结果:唾液淀粉酶只能水解淀粉而不能水解蔗糖,验证了酶的特异性,与理论相符。在温度对酶活性影响实验中,由颜色变化可以得出结论:高温降低酶活性,低温对酶活有较小的抑制作用。在pH对酶活性影响实验中,得出的结论是:高pH对酶活抑制较大,低pH对酶活抑制较小。

4讨论

从实验中可以得出结论:唾液淀粉酶具有高度特异性,其活性受温度、pH值等多种因素影响。但本组实验所得砖红色沉淀较少,有些实验组没有沉淀产生,导致实验与预期不一的原因是由于唾液淀粉酶含量存在明显的个体差异,因而为了确定恰当的唾液稀释倍数和反应时间,建议在原实验项目之前增加唾液稀释倍数确定实验。唾液淀粉酶活性存在明显的性别差异[1]和个体差异,不同个体的酶活性相差达到上百倍,其主要是由于编码该酶的基因在体内的拷贝数差异所决定的[2-3]在进行该实验操作过程中会发现不同同学的唾液淀粉酶活力不同,在实验过程中所用的唾液的稀释倍数也不同。本实验探究温度对酶活性影响的结论与预期实验结果有差异,且发现有实验证明酶的活性在沸水浴(95℃)中并没有受到影响,反而比恒温水浴(37℃)反应的更彻底[4];本实验探究温度对酶活性影响的结论与预期实验结果不一,需要改进实验方案:不要检测反应物(淀粉),用斐林试剂检测产物(还原糖)进行判断,且注意斐林试剂的用量为5%HCl用量的2倍[5]。因此,要进一步探究温度、pH对酶活性的影响,确定酶的最适温度和最适pH,需要更加严格周密的实验方案。

5参考文献

[1]归改霞.性别不同对唾液淀粉酶活性影响的研究.卫生职业

2013,31(24):110-11

[2]PerryGH,DominyNJ,ClawKG,etal.Dietandtheevolutionofhuman

amylasegenecopynumbervariation[J].NatGenet,2007,39:1256-1260.

[3]MandelAL,PeyrotdesGachonsC,PlankKL,etal.Individual

DifferencesinAMY1genecopynumber,salivarya-amylaselevelsand

theperceptionofor

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