基因工程的基本操作程序 高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3.pptx

;第1：目的基因的筛选与获取;1.作用;(4)标记基因：将含有目的基因的细胞筛选出来;3.基因表达载体的构建过程;然后用同种限制酶或能产生相同末端的限制酶切割含有目的基因的DNA片段;利用DNA连接酶将目的基因片段拼接到载体的切口处，这样就形成了一个重组DNA分子。;质粒;1.在基因表达载体构建时，能不能选择SmaI？如果不能，请表述原因。

2.方案①：单独使用PstI一种限制酶处理；方案②：同时使用PstI、EcoRI两种限制酶处理；两种方案都可得到目的基因，哪种方案更好？为什么？;“单酶切”与“双酶切”构建基因表达载体;单酶切有什么缺点?;;缺点3：;用两种限制酶切割质粒和含有目的基因的DNA片段;;方法1：花粉管通道法;;优点;转化：是指目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。;转化：是指目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。;;（二）将目的基因导入原核细胞

;（三）将目的基因导入动物细胞;如：检测棉花的染色体DNA上是否插入了Bt基因;1.分子水平的检测;1.分子水平的检测;2.个体水平的检测;;3.用限制酶切割载体和含有目的基因的DNA片段

4.用DNA连接酶连接;5.导入植物细胞：花粉管通道法；农杆菌转化法

导入动物细胞：显微注射法

导入原核细胞：感受态细胞法;6.分子水平上的检测

①检测目的基因是否导入（PCR等技术检测）

②检测目的基因是否转录（PCR等技术检测）

③检测目的基因是否翻译（抗原-抗体检测）

7.个体水平检测;转基因抗虫棉有效的控制了棉铃虫灾害，有了抗虫棉后是否就可以一劳永逸了？;谢谢！