临床病原学检查专家讲座.pptx

临床病原学检验;不一样病原体(细菌、螺旋体、支原体、放线菌、衣原体、立克次体、病毒、真菌、原虫、蠕虫)所致感染性疾病试验诊疗方法各有其特点，但几乎都遵照以下基本标准：①正确、规范采集和运输标本；②经过直接显微镜查见病原体或检出病原体抗原成份；③借助分子生物学方法检测病原体核酸；④利用免疫学方法检测机体对病原体抗原成份产生免疫产物；⑤对病原体进行分离与判定。在完成病原体检出和判定任务后，结合病人病史、症状或体征，快速作出诊疗。并主动参加临床选择抗微生物药品，指导和监控微生物治疗方案，防止耐药菌株产生。;标本采集和运输：

依据各种病原体所致感染性疾病病程确定标本采集时间、部位和种类。全部采集标本均置于无菌或清洁容器中，不能接触消毒剂和抗菌药品。标本必须注明姓名、年纪、性别、采集日期、临床诊疗、检验项目等。标本采集后应按要求处理，马上送往病原学试验室，对于烈性传染病材料运输需专员护送。;(一)血液标本

疑为菌血症、败血症和脓毒血症患者，普通在发烧早期和高峰期采集，如已用抗菌药品治疗者，则在下次用药前采集。采样以无菌法由肘静脉穿刺，成人每次10-20ml，婴儿和儿童为1-2ml，血液置于盛有抗凝剂聚茴香脑磺酸钠无菌瓶中送检。大多数菌血症呈周期性，故血标本也需在24h内周期性搜集，普通24h内搜集2-3次血标本分别培养。;(二)脑脊液与其它无菌体液标本

无菌采集脑脊液，脑脊液通常离心10000×g

lOmin，取沉淀作显微镜检验。引发脑膜炎病原体脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等其抵抗力弱，不耐冷、轻易死亡，故采集脑脊液应马上保温送检或床边接种。胸水、腹水和心包液等因标本含菌量少宜采集较大量标本送检以确保检出Tc;(三)尿液标本

外尿道借居有正常菌群，故采集尿液时更应注意无菌操作，惯用清洁中段尿作为送检标本。对于厌氧菌培养，采取膀胱穿刺法搜集、无菌厌氧小瓶运输。排尿困难者可导尿，但应防止屡次导尿所致尿路感染。;(四)呼吸道标本

鼻咽拭子、痰、经过气管搜集标本均可作为呼吸道标本。后者可防止正常菌群污染，为???呼吸道感染病原学诊疗理想标本。鼻咽拭子和鼻咽洗液可供鼻病毒、呼吸道合胞病毒、肺炎衣原体、溶血性链球菌等病原学诊疗。不合格痰标本(扁平上皮细胞≥25个／低倍镜视野)富含上呼吸道正常菌群，在病原学诊疗时需加以注意。;(五)粪便标本

取含脓、血或粘液粪便置于清洁容器中送检排便困难者或婴幼儿可用直肠拭子采集。依据细菌种类不一样选取适当运输培养液以提升阳性检出率，如副溶血弧菌引发腹泻粪便应置于碱性蛋白胨水或卡一布运输培养液。一次粪便培养阴性不能完全排除胃肠道病原菌存在，对于传染性腹泻患者需三次送检粪便进行细菌培养。对疑为寄生虫感染者，应尽快运输水样便，以保持原虫滋养体活力；若不及时送检，粪便标本置于含10％甲醛和聚乙烯醇小螺口塑料容器内保留。;(六)泌尿生殖道标本

依据不一样疾病特征及检验目标采集不一样标本，如性传输性疾病常取尿道口分泌物、外阴糜烂面病灶边缘分泌物、阴道宫颈口分泌物和前列腺液等。对生殖道疱疹常穿刺疱疹液，盆腔脓肿者则于直肠子宫陷凹处穿刺脓液。怀疑衣原体感染标本不应使用木柄拭子，因为木质对该病原体有毒性作用。除淋病奈瑟菌保温送检外，全部标本搜集后40℃保留直至培养。;(七)创伤、组织和脓肿标本

对损伤范围较大创伤,应从不一样部位采集多份标本。采集部位应首先去除污物,以碘酒,酒精消毒皮肤,预防表面污染菌混入标本影响检测结果。开放性脓肿采集,用无菌棉拭采取脓液及病灶深部分泌物。封闭性脓肿,则以无菌干燥注射器穿刺抽取;疑为厌氧菌感染者,取脓液后马上排净注射器内空气，针头插入无菌橡皮塞送检,不然标本接触空气造成厌氧菌死亡而降低临床分离率。用于病毒检测组织标本宜放在有灭菌盐水纱布培养皿内或病毒运输培养基内运输,用匀浆管匀浆、离心、过滤后,作病毒分离判定。;(八)血清标本

用于检测患者特异性抗体效价以辅助诊疗感染性疾病。采集血液置无菌试管中，自然凝固、血块收缩后吸收血清，56℃加热30min以灭活补体成份。灭活血清保留于－20℃。;检测方法

由试验技术直接或间接取得病原体及病原体结组成份，是确诊感染性疾病一个主要依据。临床试验室中细菌性疾病以培养分离技术为主，病毒性疾病以免疫学方法为主。;(一)直接显微镜检验

标本直接涂片、干燥、固定后染色，或经离心浓缩集菌，涂片染色，置光学显微镜下观察病原体形态、染色性或观察宿主细胞内包涵体特征。另一个方法是采取悬滴法或压滴法，在不染色状态下借助暗视野显微镜或相差显微镜观察病原体生长、运动方式、螺旋体形态和运动。湿式涂片有利于寄生虫虫卵检验。直接镜检结果对病原学诊疗含有一定意义，尤