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C-肽（C-P）诊断试剂盒

时间分辨免疫荧光分析法

标准操作规程

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医院：C-肽诊断试剂盒版本：

时间分辨免疫荧光分析法

科：执行日期：

标准操作规程

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1.原理

试剂盒采用双抗体夹心一步法：抗C-肽单抗包被于96孔荧免板，依次加入标准品/

3+3+

样本、铕离子(Eu)标记的抗C-肽单抗，标准或样品中的C-肽与包被单抗及Eu标记单

3+

抗于微孔内发生免疫反映，在微孔表面形成夹心免疫复合物（包被单抗—C-肽—Eu标

3+

记单抗）。洗涤去除游离的Eu标记单抗，加入荧光增强液，微孔表面免疫复合物上的

3+

Eu被荧光增强液解离，并形成稳定的荧光配合物，荧光强度与标准或样品中的C-肽浓

度呈正比例，通过标准曲线可得出样品中C-肽浓度。

2.样本解决

穿刺取血，离心后允许有凝结，用肝素作抗凝结的血浆也可，不要采用溶血的血清或

血浆样本。2～8℃条件下样本可保存5天，–20℃可保存更长时间。样本避免反复冻融。

不必要的情况下不要将样本放置在室温。室温放置48小时以上的样本不能给出可靠的结

果。

3.试剂

本科室使用苏州新波生物技术有限公司C-肽（C-P）时间分辨免疫荧光法诊

断试剂盒，试剂盒重要组分如下：

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a．C-肽校准品：冻干品（复融后储存于2～8C，一个月内使用）

A：0ng/ml；B：0.45ng/ml；C：1.05ng/ml；D：3.80ng/ml；E：12.00ng/ml；F：20.00ng/ml

b．铕标记：1瓶，1.0ml

c．实验缓冲液：1瓶，20ml

d．浓缩洗液：1瓶（40ml，使用前请用去离子水作1：25倍稀释）

e．荧光增强液：1瓶，30ml

f．微孔反映板：1块（12×8）

g．吸头：20支

h．说明书：1份

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4.仪器（用户自备）

4.1时间分辨荧光分析仪；

4.2微孔洗涤机；

4.3微孔振荡器；

5.操作环节

5.1试剂的准备

⑴洗涤液：将40ml浓缩洗液和960ml去离子水在干净的洗液瓶中混合，作为工作洗

涤液备用。

⑵校准品：在参考标准品中加入1.0ml去离子水，复融20分钟，混匀后备用。

⑶铕标记：使用前一小时内，用实验缓冲液按1：25稀释铕标记（详见操作流程图）。

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5.2