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关于高效液相色谱仪器的使用仪器的构造原理实验前的准备工作开机程序化学工作站简介关机程序仪器的维护和保养第2页,共25页,星期六,2024年,5月仪器的构造原理第3页,共25页,星期六,2024年,5月第4页,共25页,星期六,2024年,5月实验前的准备工作滤膜的选择流动相应该:HPLC级过滤:(最大0.45mm,0.2mm最好)脱气,尤其在低流速时互溶准备流动相选择合适的滤膜聚四氟乙烯滤膜:适用于所有溶剂,醋酸纤维滤膜:适用于水基溶剂,不适用于有机溶剂。尼龙66滤膜:适用于绝大多数有机溶剂和水溶液,不适用于DMF二甲基甲酰胺。注意:1,每张滤膜只能用一次。2,水相和有机相不要搞混。第5页,共25页,星期六,2024年,5月流动相使用时的注意事项?1、流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或重蒸水,酸碱液及缓冲液需经过滤后使用,过滤时注意区分水系膜和油系膜的使用范围;2、水需经常更换〈一般不超过2天〉,防止长菌变质;避免溶剂瓶直接日照。有条件的单位可向溶剂中加入0.0001-0.001mol/L的叠氮化钠。3、使用双泵时,A、B、C、D四相中,若所用流动相中有含盐,则A、D(进液口位于混合器下方〉放置含盐流动相,B、C(进液口位于混合器上方〉放置不含盐流动相A、B、C、D四个储液器中其中一个为棕色瓶,用于存放水相流动相。第6页,共25页,星期六,2024年,5月样品的准备:1、采用过滤或离心方法处理样品,确保样品中不含固体颗粒;2、用流动相或比流动相弱的溶剂制备样品溶液,尽量用流动相制备样品溶液;3、手动进样时,进样量尽量小,使用定量管定量时,进样体积应为定量管的3~5倍;第7页,共25页,星期六,2024年,5月溶剂截止波长溶剂UV截止波长(nm)乙睛190水190环己烷195己烷200甲醇210乙醇210乙醚220二氯甲烷220氯仿240四氯化碳265四氢呋喃280(220)甲苯285所以,波长应至少比所用溶剂的截止波长大20nm以上。在使用紫外检测器时,所用波长与所用溶剂的截止波长接近(或低于截止波长)时,容易产生噪音干扰,从而影响检测结果。第8页,共25页,星期六,2024年,5月开机(关)程序1、打开SealWash清洗液开关,调节流速为2-3滴/min。2、打开计算机,进入Window操作系统,并运行CAGBootpsrever程序。3、打开1100LC各模块的电源,等待仪器自检完毕,1-2min。4、双击桌面上“Instrument1Online”图标,进入1100化学工作站。开机操作:第9页,共25页,星期六,2024年,5月进入Windows系统后BootpServer自动运行,电击将BootpServer窗口最大化,开启仪器电源后上面会出现七行通讯信息记录,表明工作站通讯成功,可以进入Agilent化学工作站。注意:不能关闭BootpServer窗口,只能最小化,否则将影响工作站通讯。第10页,共25页,星期六,2024年,5月熟悉化学工作站状态工具条快捷工具条自动进样控制在线信号显示仪器参数显示区仪器控制区第11页,共25页,星期六,2024年,5月通过View切换不同的任务界面1,方法与运行控制-信号采集;2,数据处理;3,报告设计;4,OQ/PV认证;5,诊断功能;第12页,共25页,星期六,2024年,5月输入流动相的量对着瓶子击左键,然后左键单击SolventbottlesFilling,显示右面对话框在TotalVolume下输入溶剂瓶容量,一般为1.00Liter,ActualVolume下输入溶剂实际加入的量,比如0.5Liter选中下面两个选项后,在溶剂低于0.1Liter时停止样品分析,溶剂用完后泵自动关闭。第13页,共25页,星期六,2024年,5月在工作站上开启仪器每个模块右下方都有开关键,点击后出现开泵、开灯等提示,选择“Yes”即将泵、灯等打开。点击“on”将打开所有模块,点击“off”将关闭所有模块。第14页,共25页,星期六,2024年,5月改变仪器运行参数对着仪器模块点击左键然后点击SetupPump…,显示右面的对话框,
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