T_NAIA 0287-2024 枸杞中6种黄酮类物质含量的测定 液相色谱-质谱质谱法.docxVIP

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T/NAIA

团体标准

T/NAIA0287-2024

枸杞中6种黄酮类物质含量的测定液相色谱-质谱/质谱法

DeterminationofflavanoidsinwolfberryLiquidchromatography-massspectrometry

2024-05-10发布2024-05-30实施

宁夏化学分析测试协会发布

T/NAIA0287-2024

I

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。

本文件起草单位：宁夏农产品质量标准与检测技术研究所、宁夏食品检测研究院、宁夏化学分析测试协会。

本文件主要起草人：杨静、王晓菁、张锋锋、牛艳、吴燕、苟春林、王彩艳、刘霞、陈翔、开建荣、张学玲、张小飞。

本文件为首次发布。

1

枸杞中6种黄酮类物质含量的测定液相色谱-质谱/质谱法

1范围

本文件规定了枸杞中黄酮类物质的液相色谱-质谱/质谱测定方法。

本文件适用于枸杞中芦丁、异槲皮苷、槲皮素-7-O-葡萄糖苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷、6-甲氧基山奈酚-3-O-芸香糖苷和水仙苷的液相色谱-质谱/质谱法测定。

本文件的方法定量限：芦丁的方法定量限为1.00mg/kg，异槲皮苷和槲皮素-7-O-葡萄糖苷的方法定量限均为0.010mg/kg，山奈酚-3-O-芸香糖苷、6-甲氧基山奈酚-3-O-芸香糖苷和水仙苷的方法定量限均为0.050mg/kg。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义

本文件没有需要规定的术语和定义。

4原理

试样中的黄酮类物质用70%甲醇溶液提取，涡旋超声，微孔滤膜过滤，用液相色谱-质谱/质谱仪检测和确证，外标法定量。

5试剂与材料

除非另有规定外，所有试剂均为分析纯，水符合GB/T6682中规定的一级水。

5.1乙腈（CH3CN）：色谱纯。

5.2甲醇（CH3OH）：色谱纯。

5.3甲酸（CH2O2）：色谱纯。

5.4芦丁（rutin，CAS号153-18-4）、异槲皮苷（isoquercitrin，CAS号482-35-9）、槲皮素-7-O-葡萄糖苷（quercetin-7-O-glucoside，CAS号491-50-9）、山奈酚-3-O-芸香糖苷（kaempferol-3-O-rutinoside，CAS号17650-84-9）、6-甲氧基山奈酚-3-O-芸香糖苷

2

（6-methoxykaemphenol-3-O-rutinoside，CAS号403861-33-6）和水仙苷（narcissin，CAS号604-80-8）。

5.5标准溶液配制

5.5.1标准储备溶液：分别准确称取适量的芦丁、异槲皮苷、槲皮素-7-O-葡萄糖苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷、6-甲氧基山奈酚-3-O-芸香糖苷和水仙苷标准品（精确至0.01mg），用甲醇溶解，分别配制成1000mg/L的标准储备溶液，-18℃下保存。

5.5.2混合标准中间溶液：根据需要分别取黄酮类物质的标准储备液，用甲醇稀释成10mg/L标准中间溶液，-18℃下保存。

5.5.3标准工作溶液（0.01mg/L~30mg/L）：吸取一定量的混合标准中间溶液于容量瓶中，用甲醇定容至刻度。

5.670%甲醇溶液（体积分数）：量取70mL甲醇，用水定容至100mL。

5.70.1%甲酸溶液（体积分数）：量取1mL甲酸，用水定容至1000mL。

5.8滤膜：0.22μm，有机相。

5.9离心管：50mL，塑料。

6仪器与设备

6.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。

6.2分析天平：感量0.01g和0.0001g。

6.3高速万能粉碎机：10000r/min。

6.4超声波清洗机。

6.5离心机：4000r/min。

6.6涡旋混合器。

7分析步骤

7.1试样的制备

鲜、干枸杞样品于-18℃冷冻冰箱中保存。试