酶的非水相催化.ppt

*又称p-V-T关系。一般是指气体的压力、体积和温度间的关系，其数学表示式亦称状态方程。对于理想气体，关系比较简单，压力与体积的乘积除以温度为一常量。对于非理想气体(特别是处在高压、低温下)，它们间的关系比较复杂。对于不同情况有不同的半经验方程式。

*通常，水溶液中的酶分子在结构上形成亲水区和疏水区，前者位于分子的表面，与水相接触，环境中的水分子与酶蛋白功能团之间形成氢键，使蛋白质形成具有柔韧性的空间结构，称为“开放”型空间结构。但当处于有机溶剂中时，蛋白质分子的疏水区域暴露出来，分子折叠受到一定程度的破坏，带电基团之间相互作用形成非活性的“封闭”构象。酶分子结构刚性增强，对受热而引起折叠松散的抗性增强，表现为其热稳定性提高。此外，在酶分子的不可逆变性过程中，水是一个必要的参与者。如随温度升高，酶分子首先发生折叠及螺旋结构的松散，随后会发生一种或多种变性反应：形成错误的卷曲结构、S-S键受到破坏、天冬酰胺和谷氨酰胺残基脱酰胺基及天冬酰胺的肽键发生水解，上述每一步反应都有水的参与。在无水或仅含微量水的有机介质中，这一系列变性作用受到有效抑制，从而大大提高了酶的热稳定性。（1）合成反应蛋白酶在有机介质中能催化多肽的合成第46页,共77页，星期六，2024年，5月（2）转移反应酯交换反应（转酯反应）例：猪胰脂肪酶对外消旋体的拆分：第47页,共77页，星期六，2024年，5月（3）醇解反应醇解反应：酰卤、酸酐、酯等被醇分解，生成酯和其他化合物的反应例：假单胞脂肪酶催化酸酐醇解生成二酸单酯化合物第48页,共77页，星期六，2024年，5月（4）氨解反应脂肪酶催化酯类转变成胺类第49页,共77页，星期六，2024年，5月（5）异构反应D-ACL（D-3-amino-2-?-caprolactam）的异构化第50页,共77页，星期六，2024年，5月（6）氧化还原反应羰基的还原反应第51页,共77页，星期六，2024年，5月（7）裂合反应/加成反应羰基的加成反应第52页,共77页，星期六，2024年，5月2、应用实例酶催化反应应用脂肪酶肽合成青霉素G前体肽合成酯合成醇与有机酸合成酯类转酯各种酯类生产聚合二酯的选择性聚合酰基化甘醇的酰基化蛋白酶肽合成合成多肽酰基化糖类酰基化羟基化酶氧化甾体转化过氧化物酶聚合酚类、胺类化合物的聚合多酚氧化酶氧化芳香化合物的羟基化胆固醇氧化酶氧化胆固醇测定醇脱氢酶酯化有机硅醇的酯化第53页,共77页，星期六，2024年，5月酶非水相催化的应用手性技术领域手性药物拆分手性聚合物制备功能性聚合物制备可降解高分子光电功能材料其他应用食品添加剂生产甾体药物转化生物柴油的生产第54页,共77页，星期六，2024年，5月脂肪酶的非水相生物催化短链脂肪酸酯短链脂肪酸酯，是一大类十分重要的香味剂，具有多种天然水果的香味。中国，短链脂肪酸酯每年的产量为几千吨，己酸乙酯和丁酸乙酯，在国内酿造业的需求分别是3000t/at/a，1000t/a。食品中常用的乙酸乙酯（白酒、白兰地，还常用于冰激凌、糖果、面包等食品中），3000t/a。我国在食品、饮料和医药工业中每年使用价值上亿元的芳香酯。缺点：国际上化学法生产丁酸乙酯产品价格仅为2-5美元/kg，生物催化法价格180美元/kg。第55页,共77页，星期六，2024年，5月微生物脂肪酶根霉属是微生物是脂肪酶的重要生产菌，分离得到超过30种脂肪酶，已被制成商品化酶制剂，德列马根霉、华根霉、米根霉、无根根霉、黑根霉、日本根霉、雪白根霉。不同来源的脂肪酶在选择性上有所不同，来自根霉的脂肪酶大多具有高度的1、3位置专一性。应用：芳香酯、生物柴油、手性化合物

第56页,共77页，星期六，2024年，5月脂肪酶产生菌筛选：三丁酸甘油酯或吐温-80为底物的透明圈法；在橄榄油琼脂平板加入罗丹明B的荧光圈法。如Torres等人以三丁酸甘油酯平板为初筛、在异辛烷中催化合成油酸丙酯的能力为复筛。从酿造浓香型大曲酒的酒曲中筛选到一株华根霉，全细胞脂肪酶在庚烷中催化合成己酸乙酯的转化率较高，并适用于催