ISO 22964-2017克罗诺杆菌属的水平检测方法.pdf

国际标准ISO

22964

第一版

2017-04

食品微生物学—

克罗诺杆菌属的水平检测方法

参考编号

ISO22964:2017(E)

国际标准ISO22964:2017(E)

食品微生物学—克罗诺杆菌属的水平检测方法

1范围

本文件规定了一个检测克罗诺杆菌属的水平方法。

依据引言中论述的限制，本文件适用范围如下：

—供人类食用和动物饲养的食品和原料；

—食品生产和食品加工中的环境样品。

2引用标准

本文中引用了如下文件，其中部分或全部内容构成了本文件的要求。凡是注年份的，仅

注年份的版本适用于本文件。未标注年份的，最新版本适用于本文件。

ISO6887（全部）食品微生物学—初始悬浮液和十倍系列稀释的检测。

ISO7218，食品和动物饲料微生物学—微生物检验的一般要求和指导。

ISO11133，食品、动物饲料、水的微生物学—培养基的制备、生产、贮存和性能测试。

3术语和定义

下列术语及定义仅适用于本文件。

3.1克罗诺杆菌属

[10]

依据本文件进行检测，在克罗诺杆菌分离显色琼脂（CCI）上生长，并显示应有的生

化特性的微生物。

3.2克罗诺杆菌属检测

根据本文件，对一定质量或体积的产品或其表面进行克罗诺杆菌属检测。

4缩写形式

下列缩写仅适用于本文件

BPW缓冲蛋白胨水

CCI克罗诺杆菌属分离显色培养基

CSB克罗诺杆菌选择性肉汤

TSA胰蛋白胨大豆琼脂

5原则

5.1在BPW中进行非选择性预增菌

将检测样品接种于BPW中，在34℃～38℃之间培养18h±2h。

注意：克罗诺杆菌属可能会伴随着少量肠杆菌科，如阴沟肠杆菌共同出现，这会干扰检测。

5.2选择性培养基的增菌（CSB）

挑取5.1中的培养物到选择性增菌培养基上，41.5℃±1℃培养24h±2h。

5.3选取菌落在显色琼脂上鉴定（CCI琼脂）

挑取5.2中的培养物到显色琼脂上，41.5℃±1℃培养24h±2h。

5.4确证

从显色琼脂上选取典型菌落，转接于如TSA的非选择性琼脂上做纯化，进行生化特征鉴

定。

6培养基和试剂

常规实验物品见ISO7218和ISO11133。

培养基和试剂的成分及配饰方法见附录B。

培养基的性能测试见ISO11133和/或附录B。

7设备和耗材

如果有合适规格的一次性材料，可以替代重复使用的玻璃器皿。

常见的微生物实验设备（见ISO7218），特殊设备如下。

7.1干热灭菌器（烘箱）和湿热灭菌器（高压灭菌器），详见ISO7218。

7.2培养箱，34℃～38℃，37℃±1℃，41.5℃±1℃

7.3无菌接种环，直径大约3mm（10μL）、1μL和接种针。

7.4pH计，25℃下精度在±0.1pH。

7.5适当容量的试剂瓶，用于配制和储存增菌肉汤及琼脂。

7.6无菌刻度吸管或移液器，10mL、1mL、0.1mL。

7.7试管（直口或螺口）或培养瓶。容量适当，配有无毒的带衬垫的金属帽或一次性塑料帽。

7.8培养皿，直径90mm。

7.9分光光度计，能测量波长405nm