《组织学与胚胎学》的发展及技术介绍.ppt

图13免疫组织化学电镜图示上皮细胞膜MAM－6蛋白（A胶体金标记B辣根过氧化物酶标记）原位杂交术（insituhybridization）即核酸分子杂交组织化学术，检测基因（DNA片段）的有无、基因的表达活性（mRNA）原理：用带标记物的已知碱基顺序的核酸探针与细胞内待测核酸按碱基配对原则进行特异性原位结合（杂交），并通过对标记物的显示而获知待测核酸的有无及相对量常用标记物有放射性核素和地高辛光镜技术电镜技术组织化学放射自显影术图像分析图14细胞培养组织工程技术简介图14原位杂交主动脉平滑肌细胞呈弹性蛋白mRNA阳性放射自显影术（autoradiography）概念：通过活细胞对某种放射性物质的特异性摄入，以显示该物质在组织和细胞内的分布、含量和代谢过程，以反映细胞的功能状态应用举例①用3H标记的胸腺嘧啶核苷研究DNA合成和细胞增殖状态②用125I观察甲状腺滤泡内碘化部位光镜技术电镜技术组织化学放射自显影术图像分析图15细胞培养组织工程技术简介图15放射自显影示幽门部胃小凹底的干细胞（3H标记的胸腺嘧啶核苷标记）图像分析术（imageanalysis）又称形态计量术（morphometry）：应用数学和统计学原理对组织切片提供的平面图像进行分析，从而获得立体的组织细胞内有形成分的数量、体积、表面积等参数，从量的角度显示结构与功能的关系体视学（stereology）：根据连续的组织切片应用计算机进行三维重建，以获得微细结构的立体模型光镜技术电镜技术组织化学放射自显影术图像分析细胞培养组织工程图16技术简介图16计算机三维重建示肝小叶血管细胞培养术（cellculture）把从机体取得的细胞在体外模拟体内的条件下进行培养；培养组织块或器官则称组织培养术或器官培养术用于研究细胞、组织的代谢、增殖、分化、形态和功能变化，各种理化因子对活细胞的影响培养条件：营养、生长因子、pH值、渗透压、O2和CO2浓度、温度，控制污染用相差显微镜观察光镜技术电镜技术组织化学放射自显影术细胞培养组织工程图像分析图17、18技术简介图17体外培养的HeLa细胞相差显微镜图图18体外培养的平滑肌细胞（免疫组织化学染色显示肌动蛋白）组织工程（tissueengineering）用细胞培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技术正在构建的有皮肤、软骨、骨、肌腱、骨骼肌、血管、角膜等；其中以组织工程皮肤较为成功，已成为商品用于治疗烧伤、皮肤静脉性溃疡等疾病光镜技术电镜技术组织化学放射自显影术细胞培养组织工程图像分析技术简介研究包括四个方面：①种子细胞，即增殖旺盛的细胞，多为干细胞②细胞外基质，可用生物材料（如牛胶原）和人工合成高分子材料③构建组织或器官，即把细胞置于细胞外基质中进行三维培养、并形成所需要的形状④将构建物移植机体的方法光镜技术电镜技术组织化学放射自显影术细胞培养组织工程图像分析图19技术简介图19实验中的组织工程耳本章重点组织学、组织、嗜酸性、嗜碱性的概念组织学学习方法要点石蜡切片术和超薄切片术的基本原理HE染色法谢谢！**“”“”《组织学与胚胎学》的发展及技术介绍组织学（histology）研究机体微细结构及其相关功能的科学研究水平：组织、细胞、亚细胞和分子（例：心脏）研究内容组织学组织意义图1-3图1心脏（左:器官右:组织光镜图）上皮组织结缔组织肌组织图2心脏（心肌细胞光镜图）图3心脏上:肌丝结构电镜图下:肌丝蛋白质构成模式图组织（tissue）构成：细胞群和细胞外基质细胞：机体结构和功能的基本单位，成人约有1015个、200余种细胞外基质：由细胞分泌形成类型：上皮组织、结缔组织、肌组织和神经组织组织以不同的种类、数量和方式组合形成器官；若干功能相关的器官构成系统研究内容组织学组织意义促进了生理学的进步是病理学的基础促进人类对自身的深入了解研究内容组织学组织意义简称光镜（lightmicroscope，LM）16世纪末荷兰人发明→1665年胡克命名“细胞”→马尔比基观察了脾、肺、肾、表皮；列文虎克发现红细胞、精子、肌纤维；格拉夫发现卵泡→1801年比沙提出“组织”概念光学显微镜细胞学说电子显微镜当代组织学发展简史提出：施万、施莱登（1838、183