《类器官个体化抗肿瘤药物敏感性检测方法》征求意见稿.docxVIP

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类器官个体化抗肿瘤药敏感性检测方法

1范围

本文件规定了临床应用中肿瘤类器官药敏检测的方法，包括样本组织培养操作程序、药敏检测程序等内容。

本文件适用于人源肿瘤类器官的培养、传代及靶向药、化疗药物的药敏检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法GB19489—2008实验室生物安全通用要求

GB/T38736—2020人类生物样本保藏伦理要求GB50346—2004生物安全实验室建筑技术规范

YY0569Ⅱ级生物安全柜JG/T292洁净工作台

T/CSCB0001-2020干细胞通用要求

3术语和定义

GB/T38736—2020界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.1

类器官organoids

在细胞类型组成、形态结构和生理/病理功能等方面，干细胞或前体细胞在体外三维培养条件下，通过增殖、分化和自组织所形成的微型组织器官培养物，高度模拟体内对应组织器官（包括稳态和病理过程）的特征。

3.2

肿瘤类器官培养物organoidculturesoftumors

由病理诊断为恶性肿瘤患者的自体肿瘤组织或细胞样本中提取的肿瘤细胞，在三维立体培养条件下形成的与其来源组织的细胞成分、组织结构及分子表型等关键特征具有相似性的三维多细胞培养物。

3.3

类器官传代organoidpassage

将已经培养到一定大小且状态良好的类器官，采用物理机械分离或联合酶消化的方法，分散成小细胞团或单细胞悬浮液。随后，这些细胞会再次被重新接种到原始培养条件相同的

3

培养体系中，以继续进行类器官的培养。新一代的类器官在形态和功能上与原始类器官具有相似特征。

3.4

药敏检测drugsensitivitytesting

经过成功培养的肿瘤类器官将被接种到含有不同浓度化疗药物的多孔板（如384孔板或96孔板）或类器官芯片中。随后，通过培养和检测ATP含量或进行图像分析，可以计算肿瘤细胞对药物的抑制率，以评估药物的疗效和患者的敏感程度。

3.5

半抑制浓度halfmaximalinhibitoryconcentration,IC50

指当给定药物或化合物对目标生物体或细胞的生物活性（通常是抑制或抑制率）达到50%时，给定药物或化合物的对应浓度。

注：在浓度等于IC50时，药物或化合物抑制了目标生物活性的一半。3.6

类器官参考品organoidreferencematerial

能够在一定代次范围内保持稳定（如病理、测序、肿瘤药敏等）的成系肿瘤类器官，药敏检测实验中作为阴性、阳性参考品。

注：参考品通常是经过验证的，并且具有已知的特性和性能，以便与其他类器官进行比较和验证。使用类器官参考品有助于确保研究结果的可靠性和可重复性。

3.7

知情同意informedconsent

获取、处理、存储肿瘤组织的方法必须经过伦理委员会的批准。在确保充分尊重和告知人体组织提供者的权益的前提下，必须与提供者签署知情同意书。

注1：:知情同意书应包括但不限于有关组织处理方案和潜在应用场景的信息。

注2：:需要采取措施来保护组织提供者的个人信息的隐私，绝对禁止泄露可识别供体及其亲属身份的信息，如姓名、肖像、证件信息、社会关系等。见GB/T38736-2020第3.7条。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

HBSS：平衡盐溶液（HanksBalancedSaltSolution）CO2：二氧化碳（CarbonDioxide）

DNA：脱氧核糖核酸（DeoxyribonucleicAcid）

ATP：腺嘌呤核苷三磷酸(AdenosineTriphosphate)GA：悬浮细胞缓冲液（CellSuspensionBuffer）

PBS：磷酸盐缓溶液（Phosphatebuffersolution）

CB3：吸附柱（ColumnBatch3）CR3：吸附柱（ColumnReagent3）CS：过滤柱（ColumnSeparation）

GB：核酸与蛋白分离缓冲液（Nucleicacidandproteinseparationbuffer）GD：蛋白质杂质缓冲液（GuanidineHydrochlorideBuffer）

PW：去盐漂洗液（PhosphateWashBuffer）

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RDD：缓冲液（RNAse-FreeDNADigestionBuffer）