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试验目标
1、深入熟悉显微镜使用方法;
2、熟悉动植物、人体细胞基本结构;
3、掌握显微测微原理和方法,经过测微对细胞大小有所了解;
4、学习细胞计数方法;
5、掌握暂时装片、涂片制作方法。
细胞的形态观察和大小测量
第1页
试验原理
细胞是生命活动基本结构和功效单位,其形态与功效相适应,种类繁多,形态各异,有球形、椭圆形、扁平形、长梭形、星形等。即使细胞形状各异,不过它们却有共同基本结构特点,都是由细胞膜(动物),细胞壁(植物)、细胞质和细胞核组成。普通光学显微镜分辨率为0.2um,细胞中线粒体、高尔基体、中心体、核仁、染色体等细胞器长度或直径大于0.2um,普通经过一定固定染色处理后,借助显微镜能够观察细胞及其内部结构。
细胞的形态观察和大小测量
第2页
试验原理
不一样组织细胞不但形态上有差异,大小也往往各不相同。有机体每种细胞都有其特定尺寸和形态,这与它们发挥特定功效相关,而一旦细胞不能保持固有形态,其功效就会受到损害,从而会给有机体带来一系列问题。
利用显微镜附带测微尺能够对观察到细胞或其结构进行长度测量,从而对其体积进行计算。
细胞的形态观察和大小测量
第3页
试验原理
细胞计数法是细胞培养过程中一项基本技术,只有控制适当细胞密度才能确保细胞顺利生长,同时在研究细胞生长状态,绘制生长曲线等试验中也会用到细胞计数。细胞计数原理较简单,只要从需要计数细胞悬液中取一定体积悬液,稀释后在显微镜下利用细胞计数板进行计数,即可换算出原始细胞悬液中细胞密度以及细胞总数。
细胞的形态观察和大小测量
第4页
洋葱鳞茎表皮细胞
细胞的形态观察和大小测量
第5页
人口腔上皮细胞
细胞的形态观察和大小测量
第6页
人红细胞
细胞的形态观察和大小测量
第7页
神经细胞
细胞的形态观察和大小测量
第8页
酵母菌细胞
细胞的形态观察和大小测量
第9页
试验用具
1、器材:普通光学显微镜,测微尺,细胞计数板,刀片,剪刀,小镊子,玻片,擦镜纸;
2、材料:洋葱,人口腔上皮细胞,鸡血细胞悬液;
3、试剂:碘液,瑞特染液
细胞的形态观察和大小测量
第10页
试验步骤
(一)洋葱鳞茎表皮细胞观察
1.暂时装片制备:在载玻片中央滴一滴1%碘液,剥取洋葱鳞茎表皮,用小镊子撕取内表皮,用剪刀剪取0.5*0.5mm2大小平铺在碘液中,用镊子夹取一块盖玻片,将一条边缘接触碘液,然后缓缓盖在液滴上,预防产生气泡,轻压盖片,用吸水纸吸去挤出碘液。
2.将制备好装片放到显微镜下,先用低倍镜观察,寻找细胞形状规则、形态清楚区域,换高倍镜观察细胞内部结构。
细胞的形态观察和大小测量
第11页
洋葱鳞茎表皮细胞结构
细胞的形态观察和大小测量
第12页
碘液染色放大10倍洋葱鳞茎表皮细胞图
细胞的形态观察和大小测量
第13页
碘液染色放大40倍洋葱鳞茎表皮细胞图
细胞的形态观察和大小测量
第14页
(二)人口腔上皮细胞观察
1.人口腔黏膜上皮细胞涂片标本制备:在载玻片中央滴一滴1%碘液,用一根经过消毒牙签在试验者口腔内壁轻轻刮取黏膜上皮细胞,将其放入碘液中搅动使细胞散开。染色1分钟后小心加盖玻片,方法同前。
2.将制备好装片置于显微镜下观察。
细胞的形态观察和大小测量
第15页
人口腔上皮细胞结构
细胞的形态观察和大小测量
第16页
碘液染色放大10倍口腔上皮细胞图
细胞的形态观察和大小测量
第17页
碘液染色放大40倍口腔上皮细胞图
细胞的形态观察和大小测量
第18页
碘液染色放大40倍口腔上皮细胞图
细胞的形态观察和大小测量
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(三)鸡血细胞观察
1.血涂片制备:用吸管吸收少许稀释了鸡血,在载玻片右端滴一滴,另取一张载玻片,使其一条边缘接触血液,两玻片成30~45°,快速向前推移,使血液被拉成均匀薄膜。血液大小、玻片夹角、推移速度对血膜厚薄都有影响,将玻片在空气中晾干。
细胞的形态观察和大小测量
第20页
2.染色:在血膜上滴几滴瑞特染液,平置1分钟,再向染液中加入等量蒸馏水,稀释染液,继续9分钟。用自来水轻轻冲洗玻片上染液,晾干。
3.观察:分别用低倍镜和高倍镜观察血细胞形态。
细胞的形态观察和大小测量
第21页
血涂片制片方法
细胞的形态观察和大小测量
第22页
染色鸽红细胞图
细胞的形态观察和大小测量
第23页
染色鸽红细胞图
细胞的形态观察和大小测量
第24页
染色鸽红细胞图
细胞的形态观察和大小测量
第25页
未被染色鸽红细胞图
细胞的形态观察和大小测量
第26页
(四)鸡血细胞计数
1.细胞计数板结构:细胞计数板是一块7.5*3.5cm2厚玻片,通常有两个正方形计数室。计数室较周围稍低,其上覆盖一片盖玻片时,之间距离为0.1m
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