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核酸分离纯化与测序PCR技术复习题及答案
一、填空题
1.SDS是分离DNA时常用的一种阴离子除垢剂，它有四个作用：
①溶解膜蛋白及脂肪，从而使细胞膜破裂；
②溶解核膜和核小体，使其解聚，将核酸释放出来；
③对RNas、DNas有一定的抑制作用；
④SDS能够与蛋白质结合形成R-0-S03
一R一蛋白质复合物，使蛋白质变性沉淀。
...+
2.酚是蛋白质变性剂，用酚抽提细胞DNA时，具有两方面的作用：
①是蛋白质变性；
②由于它能使蛋白质变性，故也能使核小体和核糖体解聚，释放出DNA
和RNA,提高DNA的得率。
3.用酚一氯仿抽提DNA时，通常要在氯仿或酚一氯仿中加少许异戊
醇。这是因为，异戊醇是一种有机溶剂，可以降低表面张力，从而减少
气泡产生。另外，异戊醇有助于分相，使离心后的上层含DNA的水相、
中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。
4.K:①
同其他水解蛋白酶相比，蛋白水解酶具有两个显著的优点水解
②
能力强，作用范围广；在SDS和EDTA中仍保持高活性，可以同SDS和
EDTA同时使用。
5.在分离DNA时要使用金属离子螯合剂，如EDTA和柠檬酸钠等，其目
的是螯合Mg2+抑制核酸酶的活性。
6.用乙醇沉淀DNA时，通常要在DNA溶液中加入单价的阳离子，如NaCl
和NaAc,其目的是中和DNA分子的负电荷，增加DNA分子间的凝聚力。
7.DNA：4~5°C-20°C-70°C,-
通常可在三种温度下保存、、其中以
70°C最好。
①②
8.引物在因工程中至少有四个方面的用途：合成探针；合成
③
cDNA；用于PCR反应；
④进行序列分析。
9.Clar发现用DNA聚合酶得到的PCR反应产物不是平末端，而是有一
个突出碱末端的双链
DNAPCRT
分子。根据这一发现设计了克隆产物的载体。
1%
10.在用SDS分离DNA时，要注意SDS的浓度，0.和1%的SDS的作
用效果是不同的，前者只
RNA,DNARNA
将分离出来后者可将和一同分离出来。
11.DNA
在分离过程中，通常要进行透析，其目的是除去小分子的无机
离子。
①
12.在分离质粒DNA的菌体培养过程中，加入氯霉素有两个好处：可以
扩增质粒DNA；
②抑制菌体数量，有于裂解。
13.在DNA分离过程中造成DNA分子断裂的因素很多，主
①②
要有：核酸酶降解；化学降解；
③物理剪切。
14.在DNA保存液中，常加一滴氯仿，主要是起抑制真菌污染的作
用。
15.按照人们的意愿，改变因中碱的组成，以达到因突变的技术
称为定点突变。
16.cDNAS1
在的合成中要用到核酸酶，其作用是切除在第二链合成时
形成的发夹环。
17.在简并引物的设计中，常常要用到di
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