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摘要

论文题目:大肠杆菌内源过氧化氢检测方法的建立

学院及专业:食品与生物工程学院食科

本科生:

指导教师:

摘要

本实验旨在通过物理、化学方法的对比及探索改进，找出一种检测细菌內源过氧化氢的模型方法。

本实验以大肠杆菌突变体为研究对象，首先以30%的HO为研究对象，确定其22

原液的浓度，然后通过辣根过氧化物酶—酚红法、荧光法、硫酸钛法三种不同方法绘制出不同的标准曲线，最后根据不同的标准曲线计算出20个大肠杆菌抗氧化基因突变体菌株在同一生长时期时內源过氧化氢的释放量。

结果显示:30%的HO原液浓度为6.9M，三种检测方法绘制出来的标准曲线的22

线性相关系数分别是0.9963、0.9936、0.997，根据辣根过氧化物酶—酚红法和荧光法不同的线性关系计算出来不同菌株HO的释放量都有明显的差异，范22

围在1μM,10μM之间。硫酸钛法的检测区间在10μM,500μM之间，明显检测不到大肠杆菌抗氧化基因突变体菌株中內源过氧化氢的释放量。

通过分析对比发现三种方法中辣根过氧化物酶—酚红法和荧光法都可以检测到大肠杆菌抗氧化基因突变体菌株中內源过氧化氢的释放量，硫酸钛法检测不到，但是辣根过氧化物酶—酚红法比较繁琐且需要严格控制反应条件，而荧光法的灵敏度比较高，操作也比较简单方便。

关键词:內源过氧化氢，检测方法，大肠杆菌，突变体

I

摘要

Subject:Measureassaysestablishmentofendogenoushydrogen

peroxideinEscherichiacoli

CollegeandSpecialty:CollegeofFoodBioengineering

FoodScienceEngineering

Name:

Supervisor:

ABSTRACT

Thisexperimentisforthepurposeofdiscoveringonedetectionmodelmethodtodetectendogenoushydrogenperoxidebyphysical,chemistrymethodcontrastandtheexplorationimprovement.

ThisexperimenttakestheEscherichiacolimutantsastheobjectsofstudy,firsttake30%HOastheobjectofstudyanddeterminethedensityofitsoriginalfluid,then22

throughthehorseradishperoxideenzyme-phenolredmethod,thefluorescencemethod,thetitaniumsulfatemethodthreedifferentmethodsdrawsupthedifferentstandardcurve,FinallyaccordingtodifferentstandardcurvetofigureoutendogenoushydrogenperoxidereleasequantityofthetwentyEscherichiacolioxidationresistancegenemutantstrainsintheidenticalgrowthperiod.

Theresultsshowedthat30%HOoriginalfluiddensityis6.9M,usethreedetection22

methodstodrawupthestandardcurves,andwhoselinearcorrelationcoefficientrespectivelyare0.9963,0.9936,0.997,calculatesthattheHOreleasequantityof22

differentstrainshavetheobviousdifferenceaccordingtodifferentlinearrelationshipofthehorseradishperoxideenzyme-phenolredmethodandthefluorescencemethod,thescopeisbetween1