p53对PA28γ基因转录调控的影响的开题报告.docxVIP

p53对PA28γ基因转录调控的影响的开题报告

一、研究背景及意义

p53是一种重要的细胞周期调控蛋白，其功能失调与多种肿瘤的发生密切相关。研究表明，p53不仅仅是一种抑癌基因，还能对许多基因的转录进行调控。比如，p53可以通过直接结合DNA的方式对某些靶基因进行转录的抑制或激活，并进而对细胞周期的进程和apoptoticresponse等方面产生决定性影响。PA28γ是一种与蛋白质降解相关的以ATP为驱动力的免疫活性复合物，主要存在于细胞核内。需要注意的是，在过去的研究中已经有很多证据显示，PA28γ的异常表达也与肿瘤的发生和发展有很大关联。因此，我们要探究p53对PA28γ基因转录调控的影响，对阐明肿瘤的发生机制和寻找治疗肿瘤的新靶点、设计新的治疗方案等都具有极其重要的意义。

二、研究内容及方法

我们将在人类胚胎肺成纤维细胞（HELF细胞）中，使用RT-PCR、Westernblot等技术，研究p53对PA28γ基因的转录和翻译调控作用。具体方法如下：

1.构建PA28γ启动子、p53表达质粒和空质粒。

2.观察p53表达质粒对HELF细胞中PA28γmRNA表达的影响

3.分别用PCA、HDM、DOX刺激HELF细胞，并以p53siRNA抑制细胞内p53的表达，再使用RT-qPCR来测定细胞内的PA28γ基因的mRNA表达量。

4.Westernblot检测细胞内PA28γ蛋白的表达量。

五、预期结果

预计本研究结果将从两个方面对p53对PA28γ基因转录调控的影响进行研究。一方面，可以了解PA28γ在肿瘤的发生和发展中的作用，进一步探究肿瘤的发生机理；另一方面，可以探讨以p53作为肿瘤治疗和预防方案设计的靶点的有效性，寻找新的肿瘤治疗途径。