马铃薯组培可编辑.pptxVIP

;马铃薯是世界第四大粮食作物,在我国粮食、蔬菜、饲料和加工原料生产上占有重要地位,同时由于其产量高,营养丰富,适应性强而分布极广。

马铃薯的经济效益是非常可观的，?但是马铃薯在栽培过程中极易受病毒感染并通过块茎逐代积累，从而出现马铃薯退化现象。?而马铃薯的组培工作是解决马铃薯退化问题使其保持优良种性，达到高产高效的目的有效途径。

;目录;外植体的选择;外植体的分化程度影响愈伤组织诱导和继代

外植体的生理状态影响器官分化

外植体的选择对体细胞胚的诱导和后熟有影响

试管快繁需要适宜的外植体

脱毒率与外植体大小，生理状态有关

;实验一：取东农303和Favorita脱毒无菌苗去腋芽的茎段(0.3cm长)、幼叶(0.3x0.3cm)，东农303的微型薯和种薯的薯块用0.1%氯化汞消毒10min后去皮与芽眼，取内层块茎(0.5x0.5cm，厚0.2cm)分别接种于MS基本培养添加不同植物激素的6种诱导培养基

从表1结果可看出同一种基因型Favorita以不同外植体、在不同培养基中的愈伤诱导率与分化率均不同，茎段的愈伤诱导率明显较高，均达100%。

;东农303在6种培养基中诱导4种外植体产生的愈伤诱导率以茎段为最高，达100%,之后依次为幼叶、微型薯、种薯。

;实验结论：从实验结果可知，在不同培养基中培养时不论是叶片，还是去腋芽的茎段，两种基因型的芽分化率相似。而同一个基因型不同外植体的分化率差别较大，例如，东农3034种外植体的平均分化率变化在2.07%33.14%，最高值与最低值相差十几倍。这暗示马铃薯作为受体进行遗传转化时，选择高植株再生率的外植体类型可能比选择基因型更重要。;

实验二：供试脱毒苗在2MS＋BAP1.0mg/L+NAA0.1mg/L+GA30.1mg/L+白糖20.0g/L＋琼脂4.0mg/L（pH=5.8）的培养基上培养健壮苗，待小植梢长至10片叶时，灭菌条件下将小植梢切成顶部4片叶、5～7片叶和8～10片叶的3部分，顶部切成第1～2片叶、第3片叶和第4片叶的3个茎段，构成顶部外植体，第5～7片叶部分切成一叶茎段，构成植株中部外植体，第8～10片叶切成一叶茎段构成植株基部外植体。

;通过试验，证明植株中部结薯率最高;马铃薯脱毒;马铃薯卷叶病;脱毒方法;???低温疗法;化学方法;墨西哥大学研究人员采用电流处理及苗尖培养使感染病毒的马铃薯植株脱去了马铃薯X病毒。实验将感染病毒的马铃薯茎尖浸于带电的水中（较宽范围的电流强度—时间组合），随后将苗尖进行立体培养。结果发现，在电疗期间茎组织温度从4℃升至10℃；与未处理的对照相比，经电流处理后促进了器官发生及脱毒作用。采用15mA的电流处理组织5min获得的效果最佳。在这种处理条件下，有40%-80%的芽产生小植株，培养60d后有60~100%的再生小植株脱去病毒。研究表明电流的影响并不是温度的身高引起的，因处理期间的组织温度与处理轻度或脱毒程度之间没有相关性。作者还认为，电疗法及随后的茎尖培养对感染植株的脱毒效果比热疗法（热处理法）更有效，而且仅需几分钟就达到脱毒效果[13]。因此，电疗法脱出病毒的机理有待进一步的研究。;马铃薯病毒的检测技术——免疫学方法;(1)DAS一ELISA是以聚苯乙烯塑料管或血凝滴定板为支持物,直接ELISA,基本步骤是先加入第一抗体。再依次加入病毒提取液、第二抗体、底物。所以叫做双抗体夹心,利用该技术成功地对马铃薯各种病毒病进行了检测，DAS一ELISA可检测出1一10ng/mL的抗原浓度,特异性强,灵敏度高,适合于大规模的检测,对脱毒苗的确认极具应用价值。

;(2)NCM一ELISA方法是以硝酸纤维素膜(NCM)为固相载体,常采用间接ELISA,基本步骤是首先将待测样品点在NCM膜上,然后依次加入病毒第一抗体、第二抗体、底物。NCM一ELISA技术灵敏度高,经济简便,快速直观,对基层单位特别有用。;马铃薯病毒的检测技术——分子生物学方法;马铃薯病毒的检测技术——分子生物学方法;培养基成分对马铃薯组培的影响;

;培养基含有水、氮源、无机盐、碳源、生长因子等。

水：实验表明用水处理设施处理过的水优于一般蒸馏水。

碳源：有糖类、油脂、有机酸及有机酸酯和小分子醇。

活性炭：可以促进马铃薯组培苗诱导、增殖和壮苗以及生根，对于活性炭的吸附机理和改善外植体褐变情况也有待进一步研究。

;食用白糖和活性炭互作诱导马铃薯试管薯的研究;8%食用白糖是Atlantic试管薯诱导的适宜浓度.试验表明对于Atlantic品种,以MS固体培养基为壮苗培养基,补加MS+8%食用白糖+1.5g/L活性炭的液体培养基,采取固-液双层培养体系,可得到高结薯率、高大薯率和高质量的Atl