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中药药理学实验

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中药药理研究方法学实验讲义

药理实验室

一茶异硫氨酸醋或胆管结扎均可致胆汁郁积型黄疸模型。④免疫性肝损伤模型:取异种或同种动物的肝提取物作为抗原免疫纯系小鼠可制备该模型。可检测的指标有血清或肝脏AST、AIT活性,P-450活性,肝糖原、血清总蛋白、白蛋白含量,血NH3、胆红素浓度等。作为抗脂肪肝、肝硬化药物,还可检测肝脏胶原蛋白含量、凝血酶时间等,同时可进行病理组织学观察。

利胆实验主要有正常大鼠的胆汁流量测定,离体胆囊肌片舒缩活动描记、整体动物的胆道内压测定,由细菌造成化脓性胆管炎后对模型动物的胆汁流量、胆汁成分含量、odｄｉ氏括约肌张力等指标进行测定,对胆石标本进行胆固醇、钙、胆红素等成分的含量测定等。

涉及消化系统药理实验方法研究的常见中药有理气药、温里药、补气健脾药。

第一节药物对小鼠胃肠运动的影响

一、药物对小鼠胃排空的作用

【目的】①学习小鼠胃排空的实验方法。

②观察胃动力药及健脾行气药物对胃排空功能的影响。

【原理】

胃排空是指胃内食糜由胃排入十二指肠的过程。进食后近端胃可通过迷走神经调节而出现受容性舒张，起到暂时容纳与储存食物的作用，然后通过缓慢持续地收缩，压迫其内容物向胃窦方向移动，再依赖胃窦收缩及胃和十二指肠协调运动而排空。通过观察胃动力药吗丁琳及健脾行气药枳术丸对小鼠定量灌服营养性半固体糊剂20分钟后，胃全重和胃净重之差的胃内残留物重量,计算胃内残留物占所灌半固体糊的重量百分比为胃内残留率，可了解药物对胃排空运动的影响。

【材料】

动物:小鼠,体重18～22g。

药品:lmg/ml吗丁琳混悬液、1g/ml枳术丸水煎剂。

营养性半固体糊剂:16g奶粉、8g葡萄糖、8g淀粉，搅拌均匀，加以蒸馏水至300ml搅拌均匀。

主要器材:手术器械、电子天平、小烧杯、小鼠灌胃器。

【方法】

取小鼠,禁食不禁水18h后,称重,编号,随机分成三组。各组均按0.2ml/10g体积灌胃给药，空白对照组给予等容积蒸馏水，50min后各组均ig给予营养性半固体糊0.6ml/只。20min后脱颈椎处死动物，剖开腹腔，结扎胃贲门和幽门后，取胃，用滤纸拭干后称全重，然后沿胃大弯剪开胃体，洗去胃内容物后拭干，称净重。以胃全重和胃净重的差值为胃内残留物重，胃内残留物重占所灌半固体糊的重量百分比为胃内残留率。

胃中残留率(%)=胃中残留物/所灌半固体糊X100%

实验结束后数据作全班统计,计算各组胃中残留率的平均数(X)和标准差(s),以t检验统计法进行组间比较。

【结果】将结果填入表1-1-1

表1-1-1

组别

剂量(g/kg)

动物数(n)

胃中残留率(%)

空白对照组

吗丁琳组

枳术丸组

【注意事项】①实验前小鼠必须严格禁食18h,最好将小鼠置于能漏出粪便的代谢笼内。②解剖分离胃体的部位应尽量仔细,以胃内容物漏出影响实验结果。③如是观察浓度较大中药煎剂的作用要注意药物殘留也会影响实验结果。④胃内容物的性状与化学成分均可影响胃排空和速度。

【思考题】①吗丁琳的主要药理作用有哪些?其促进胃排空的作用机制是什么?

②从药理学的角度解释枳术丸组为什么常用于功能性消化不良的治疗？

二、药物对小鼠小肠运动的影晌

【目的】①学习用炭未推进法测定动物小肠运动的实验方法。

②观察M受体阻断药阿托品和泻下药芒硝对小肠运动的影响。

【原理】

消化管内容物的移动速度与胃排出时间、小肠的运动及消化管内容物的流动性有关。小肠的运动受肠神经及外来神经的控制，当机械和化学的刺激作用于肠壁感受器时，可通过局部的壁内反射而引起小肠蠕动增加，而副交感神经兴奋时可增强小肠运动，交感神经兴奋则产生抑制作用。利用口服炭末在肠道不被吸收的原理,以炭末作为指示剂,测定在一定时间内炭末在肠道的推进距离,可观察M受体阻断药和泻下药对小肠推进的作用。

【材料】

动物:小鼠,体重18～22g。

药品:用含有2%阿拉伯胶的水溶液制成12%活性炭末混悬液、生理盐水、盐酸阿托品、100%芒硝水溶液。

主要器材:手术剪、眼科慑、直尺、注射器、灌胃针。

【方法】

取禁食不禁水20h的小鼠,随机分组,称重,编号。各给药组动物分别皮下注射阿托品(10ｍｇ/ｋｇ)，灌胃给予200%芒硝水溶液(0.2ｍｌ/10ｇ)，空白对照组给予等容积蒸馏水。灌胃体积均为0.2ml/10g，20min后各组均灌胃给予10%的炭黑混悬液0.6ml/只。20min后脱颈椎处死动物，剖开腹腔，分离肠系膜，剪取上端至幽门,下端至回盲部的肠管，轻轻将小肠拉直，准确量取小鼠幽门至炭黑推进前沿的长度以及小鼠小肠总长，按下式计算推进百分率。

炭黑推进百分率＝(炭未从幽门部到推进前沿的移动