猪圆环病毒核酸检测方法.pdfVIP

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猪圆环病毒病诊断技术

1范围

本文件规定了猪圆环病毒病(PCVD)的临床诊断、病毒分离与鉴定、间接免疫荧光试验(IFA)、

免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)、聚合酶链式反应(PCR)、实时荧光聚合酶链式反应(荧光

PCR)、间接酶联免疫吸附试验(间接ELISA)、阻断酶联免疫吸附试验(阻断ELISA)等技术要求。

本文件适用于PCVD的诊断、检疫、检测、监测和流行病学调查。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款-,其最新版本(包括所有

的修改单)适用于本文件。

GB/T25172猪常温精液生产与保存技术规范

NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

AEC:3-氨基-9-乙基咔唑(3-amino-9-ethylcarbazole)

BSA:牛血清白蛋白(bovineserumalbumin)

Ct:循环阈值(cyclethreshold)

DAPI:4,6-二脒基-2-苯基吲哚(4,6-diamidino-2-phenylindole)

DEPC:焦炭酸二乙酯(diethypyrocarbonate)

DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid)

EDTA:乙二胺四乙酸(ethylenediamineteraaceticacid)

ELISA:酶联免疫吸附试验(enzymelinkedimmunosorbentassay)

FITC:异硫氰酸荧光素(fluoresceinIsothiocyanate)

HRP:辣根过氧化物酶(horseradishperoxidase)

IFA:间接免疫荧光试验(indirectimmunofluorescenceassay)

IPMA:免疫过氧化物酶单层细胞试验(immunoperoxidasemonolayelassay)

MEM:最低限度必需氨基酸营养液(minimumessentialmedium)

OD:光密度(opticaldensity)

PBS:磷酸盐缓冲液(phosphatebufferedsaline)

PCR:聚合酶链式反应(polymerasechainreaction)

1

PCV2:猪圆环病毒2型(porcinecircovirustype2)

PCVD:猪圆环病毒病(porcinecircovirusdisease)

PK-15:猪肾细胞系(pigkidney-15cellline)

PMWS:断奶仔猪多系统衰竭综合征(postweaningmultisystemicwastingsyndrome)

PDNS:猪皮炎肾病综合征(porcinedermatitisnephropathysyndrome)

PRDC:猪呼吸道疾病综合征(porcinerespiratorydiseasecomplex)

TAE:三羟甲基氨基甲烷-乙酸-乙二胺四乙酸缓冲液(tris-aceticacid-EDTAbuffer)

TMB:3,3,5,5-四甲基联苯胺(3,3,5,5-Tetramethylbenzidine)

TritonX-100:曲拉通X-100,聚乙二醇辛基苯基醚(2-(2-[4-(1,1,3,3-Tetramethylbutyl)phenoxy]

ethoxy)ethanol)

5临床诊断

5.1流行病学

5.1.1猪是天然宿主,家猪、野猪均是易感动物,各种年龄、品种的猪均易感。

5.1.2传染源为病猪、临床健康带毒猪。

5.1.3主要通过消化道、呼吸道等途径传播,也可通过发病或带毒妊娠母猪通过胎盘感染胎儿。。

5.2临床症状

5.2.1断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)

主要发生于仔猪断奶后,2月龄~4

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