生物化学检验常用技术.pptx

生物化学检验常用(chánɡyònɡ)技术;;一、吸收光谱(xīshōuɡuānɡpǔ)分析法;4;5;6;第七页，共65页。;Lambert-Beer定律适用于:

可见光、紫外光、红外光和均匀(jūnyún)非散射的液体以及分散均匀(jūnyún)的固态或气态样品.;在分光光度法中，为消除显色剂及样品中各种共存有色物质产生的干扰、抵消(dǐxiāo)比色皿和试剂对入射光的影响而用来调节仪器百分透光率为100%的溶液。;(二)、分光光度法在生化检验(jiǎnyàn)中的应用;11;5.标准溶液设置的浓度范围足够大。;13;二、发射光谱(fāshèɡuānɡpǔ)分析法;火焰光度法是以火焰为激发光源，用光电检测系统测量被测元素所发射的辐射强度来进行定量分析(dìngliàngfēnxī)的方法。

它是一种简化的发射光谱分析法;火焰(huǒyàn)光度法的特点;1、激发(jīfā)条件;（二）、荧光(yíngguāng)分光光度法;三、散射(sǎnshè)光谱分析法;;一、电位(diànwèi)分析法―ISE;;离子选择性电极的类型和品种(pǐnzhǒng)很多，外形也差异很大；但基本结构都包括：对特定离子有选择性响应的薄膜(敏感膜或传感膜)、内参比溶液与内参比电极。

敏感膜将内侧参比溶液与外侧的待测离子溶液分开，是电极的关键部位。;电极(diànjí)电位;电极(diànjí)电位测量;;;玻璃(bōlí)膜电极;气敏电极(diànjí);第三十页，共65页。;CO2+H2O===HCO3-+H+

NH3+H2O===NH4++OH-

SO2+H2O===HSO3-+H+

2NO2+H2O===NO3-+NO2-+H+

H2S+H2O===HS-+H3O+

HCN+H2O===H3O++CN-

HF+H2O===H3O++F-;;;①标准(biāozhǔn)曲线法

②标准(biāozhǔn)比较法

③标准(biāozhǔn)加入法

;二、电导分析法;;一、干化学分析(huàxuéfēnxī)技术的基本原理;反射(fǎnshè)光度法;漫反射光是指从光源发出的光进入样品内部，经过多次反射、折射、散射及吸收(xīshōu)后返回样品表面的光．;差示电位(diànwèi)法;二、干化学分析技术(jìshù)在临床检验中的应用;第四十二页，共65页。;仪器(yíqì)检测:;;一、电泳分析技术(jìshù)的基本原理;电泳迁移率;47;溶液的酸碱度决定(juédìng)被分离物质的解离程度和带电性质及所带净电荷量。pH与pI差值越大，粒子带电??越多。;缓冲溶液的离子(lízǐ)强度影响缓冲容量、电泳速度和产热效应;4、支持(zhīchí)介质;二、常用(chánɡyònɡ)电泳技术及应用;按电泳(diànyǒnɡ)支持物分类;第五十三页，共65页。;(五)等电聚焦(jùjiāo)电泳(IEF);;一、PCR反应(fǎnyìng)基本原理;

;PCR基本反应(fǎnyìng)步骤;第一轮循环(xúnhuán);第二轮循环(xúnhuán);第三次循环(xúnhuán);;一种新的核酸微量分析技术。

尤其(yóuqí)在定量RT-PCR中具有重要价值。

实现了PCR技术从定性到定量的飞跃。;实时PCR技术(jìshù)原理示意图;内容(nèiróng)总结