蛋白质加工与输送.ppt

*（四）细胞核蛋白的靶向输送多种细胞核蛋白在胞液合成后输入核内，各种大分子及核内组装的核蛋白体亚基都是通过核孔进出核膜。核定位序列＊（nuclearlocalizationsequence,NLS)所有靶向输送的胞核蛋白多肽链内含有特异信号序列结构：为4－8ＡＡ残基的短序列，富含带正电的赖、精氨酸及脯氨酸肽链中位置：不只在N末端，可位于肽链不同部位。特点：NLS在蛋白质进核定位后不被切除。不同NLS间未发现共有序列。第64页,共83页，星期六，2024年，5月*真核细胞－－有丝分裂完成后细胞核膜重建时，在胞液的各种具有NLS的胞核蛋白可被重新靶向导入核中。新合成胞核蛋白靶向输送涉及几种蛋白质成分：核输入因子（nuclearimportin)－α和βαβ异二聚体可作为胞核蛋白受体，α识别结合NLS序列。Ran蛋白(一种小GTP酶)：Ran-GDP帮助输入蛋白入核，而Ran-GTP则是介导空载的输入蛋白β亚基出核。第65页,共83页，星期六，2024年，5月*第66页,共83页，星期六，2024年，5月*蛋白质分子在细胞内的降解细胞内的蛋白质处于不断更新过程，基本上处于一个动态平衡：不断被合成，不断被降解。第67页,共83页，星期六，2024年，5月*一、与蛋白质降解相关的末端和内部序列细胞内的蛋白质，出于细胞活动对特异蛋白质的需要，各自都具有一定的寿命，长短不一。此外，细胞中受损蛋白、折叠或组装错误的蛋白都应及时清除。第68页,共83页，星期六，2024年，5月*1.研究表明，蛋白质分子N-末端残基影响蛋白质的寿命。（1）稳定残基（stabilizingresidues)：Cys,Ala,Ser,Thr,Gly,Val,Met30Hours（2）一级去稳定残基（primarydestabilizingresidues):Lys,Arg,His;Phe,Leu,Ile,Tyr,Trp.3min（3）二级去稳定残基（secondarydestabilizingresidues):Asp,Glu,Cys。这些氨基酸可以被Arg-tRNA-蛋白转移酶（R-transferase)识别，然后在末端加上一个Arg残基。（4）三级去稳定残基:Asn,Gln.可被一种N末端酰胺水解酶作用而变成Asp,Glu,之后再被Arg-tRNA-蛋白转移酶（R-transferase)识别，然后在末端加上一个Arg残基。第69页,共83页，星期六，2024年，5月*2.存在肽链内部的一些保守序列:如Arg-X-X-Leu-Gly-X-Ile-Gly-Asx和Pro-Glu-Ser-Thr(即PEST序列）第70页,共83页，星期六，2024年，5月*不依赖ATP和泛素；利用溶酶体中的组织蛋白酶(cathepsin)降解外源性蛋白、膜蛋白和长寿蛋白质。（一）蛋白质在溶酶体通过ATP-非依赖途径被降解二、真核细胞内蛋白质的降解有两条重要途径（二）蛋白质在蛋白酶体通过ATP-依赖途径被降解依赖ATP和泛素降解异常蛋白和短寿蛋白质第71页,共83页，星期六，2024年，5月*溶酶体是蛋白质降解的重要场所。细胞内外的蛋白质都可以通过不同的方式进入溶酶体。细胞外的蛋白质，以及细胞质膜上的受体蛋白质，几乎都是通过胞吞方式进入溶酶体的。细胞内蛋白质进入溶酶体有非选择性和选择性两种形式。前者又可分为自体吞噬和分泌自噬；后者则是由氨基酸残基序列模体KFERQ介导的，但在营养充足的细胞中，该途径是关闭的。（一）蛋白质在溶酶体通过ATP-非依赖途径被降解第72页,共83页，星期六，2024年，5月*2004年10月16日瑞典皇家科学院将本年度诺贝尔化学奖授予以色列科学家阿龙·切哈诺沃、阿夫拉姆·赫什科和美国科学家欧文·罗斯，以表彰他们在泛素调节的蛋白质降解研究领域中的卓越成就。

（二）蛋白质在蛋白酶体通过ATP-依赖途径被降解第73页,共83页，星期六，2024年，5月*泛素(ubiquitin，Ub)76个氨基酸组成的多肽(8.5kD)普遍存在于真核生物而得名一级结构高度保守酶促反应：其Gly与靶蛋白的Lys侧链相连；多聚泛素链。1.细胞内蛋白质降解过程中的重要物质第74页,共83页，星期六，2024年，5月*第75页,共83页，星期六，2024年，5月*酶E1,E2和E3E1:泛素活化酶，负责激活泛素，泛素分子被激活后被送到E2。E2:泛素结合酶，负责把