D-二聚体检测的常见问题.pdf

D-⼆⼆聚聚体体检检测测的的常常见见问问题题

近年来，D-⼆聚体作为体内交联纤维蛋⽩⽔解的标志性产物，其床诊断价值已得到普遍认

同。它以其⾼度的敏感性和阴性预⽰能⼒，在深静脉⾎栓（DVT）和肺栓塞（PE）的排除、弥

散性⾎管内凝⾎（DIC）的诊断及溶栓治疗监测等⽅⾯具有良好的床应⽤价值。

虽然D-⼆聚体检测已得到推⼴普及，但在D-⼆聚体实际应⽤中，仍存在⼀些对检测参数的认识

误区，致使实验室对⼀些检测结果难以为床提供合理解释，对由于⽅法学不同造成的检测结

果差异缺乏⾜够的理解，给科室质量管理带来困惑。

⼀、不同试剂检测结果不可⽐性

D-⼆聚体检测的基本原理均是基于抗原抗体反应。⾃1983年Rylatt等最先报道了D-⼆聚体的单

克隆抗体后，有20多种D-⼆聚体单抗研发问世，⽬前有超过30种检测⽅法和20多种单抗被使

⽤。由于⽅法学上的原因，不同试剂测定同⼀份标本中的D-⼆聚体浓度往往不具有可⽐性。其

原因主要有：

1.单克隆抗体不同

这⾥需要说明的是，我们通常所说的“D-⼆聚体”,在循环体内并不是⼀个结构简单均⼀的物质，

⽽是含有D-⼆聚体结构的⼤⼩不同⽚段的混合物（如DD、DY、XD、XY、DXD、YXD、

DXXD等，分⼦量为190KDa-720KDa）。

针对不同⽚段制备的单克隆抗体对同⼀份⾎浆中不同⽚段的结合能⼒也不同。⽬前尚⽆国际统

⼀标准的单抗，也⽆统⼀的参考⽅法。

另外，在⾃动化凝⾎仪上采⽤的免疫⽐浊法测定还受到乳胶颗粒特征的影响，各试剂制造商选

择乳胶颗粒⼤⼩不等，结合单抗能⼒也有差异，反应后吸光特性也不⼀样。单克隆抗体特异性

差异和试剂⽣产⼯艺的不同，致使各试剂间检测D-⼆聚体的结果缺乏可⽐性。

2.报告结果缺乏统⼀的标准单位

D-⼆聚体检测的报告单位通常包括纤维蛋⽩原等量单位（FEU）和D-⼆聚体单位（DDU）两种

形式。FEU是将D-⼆聚体的量⽤降解前纤维蛋⽩原分⼦的量来表达，因此，⽤FEU表达的D-⼆

聚体的量相当于⽤DDU表达的约1.7-2.0倍。

在D-⼆聚体报告⽅式中还包括ngmL、ugmL和mgL等形式。通常应该直接采⽤制造商提供的单

位，不建议进⾏形式和量纲的转换。

3.参考区间不同

各试剂制造商在试剂使⽤说明书中提供的参考区间，除因⽅法学和单抗因素之外，通常所选的

受试⼈群也是不同的，特别是进⼝试剂，种族、性别、年龄和⽣理等⽅⾯的差异都会造成统计

结果的不同，直接应⽤试剂说明书中的参考区间，往往会出现⼀些难以解释的现象，甚⾄误导

床应⽤。

4.校准品不同

由于每种试剂所使⽤的抗体不同，因此相应的校准品不同，⽬前校准物包括交联纤维蛋⽩凝块

被消化处理后的⾎浆，部分纯化的D-⼆聚体制品及⾼分⼦量纤维蛋⽩寡聚体制品等。

⽣产制造商选择适合其产品的校准品，但是⼀种定值校准品并不适⽤于另⼀品牌的试剂，因

此，D-⼆聚体测定没有参考标准，⽅法之间校准的可能性也很低。

⼆、参考区间与cutoff值

如前所述，由于D-⼆聚体检测的⽅法学及所⽤抗体的差异，要求实验室建⽴⾃⼰的参考区间和

⽤于排除深静脉⾎栓和肺栓塞的cutoff值。

参考区间的建⽴相对较易，它所反映的是当地健康⼈群D-⼆聚体的⽔平。⽽cutoff值的建⽴则较

为复杂，它所反映的是怀疑有DVT和PE的病⼈是否真有DVT和PE可能的界值。

国外通常采⽤以下步骤建⽴：1.在不同地区建⽴样本采集点；2.收集门诊怀疑有DVT和PE的病

⼈样本，样本量⾄少在300⼈以上，其中包括25%的患者确诊为PVT或PE;3.病⼈选择，采⽤

Wells的验前概率（PretestProbabilityPTP）评估规则和影像学检查，并对阴性病⼈进⾏为期

三个⽉的随访，以最终确诊是否患有DVT或PE;4.剔除预防或抗凝治疗的病⼈和孕妇；5.对所有

选中的疑似患者同时进⾏D-⼆聚体检测和影像学检查；6.对D-⼆聚体检测结果作受试者⼯作特

征（ROC）曲线并确定cutoff值。

⽬前尚未见国内有关D-⼆聚体检测cutoff值建⽴的正式报道。鉴于样本采集较为困难，CLSI（美

国床实验室标准化协会）建议可以采⽤试剂制造商提供由权威机构（如FDA）验证的cutoff值

（CLSIH59-P）。

值得注意的是，D-⼆聚体检测的cutoff值只是⽤来排除DVT和PE,⽽不是⽤于区别健康⼈群与⾮

健康⼈群；参考区间则是判断除排查DVT和PE以外其他疾病引起D-⼆聚体异常的参照指标。

Cutoff值有可